黑木相思离体培养与再生系统的建立

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1、福建农林大学2006届硕士学位论文摘要黑木相思(Acaciamelanoxylon)，是近年来我国南方引进的主要用材树种之一，它具有适应性强、速生丰产、耐寒冷、用途广泛等特点。本试验以4个不同种源黑木相思种子为基本材料，从无菌体系的建立、继代培养、生根诱导、炼苗移栽等各个环节展开研究；以种子无菌萌发下胚轴为诱导愈伤组织的起始材料，建立起4个不同种源黑木相思愈伤组织体系，并从愈伤组织分化出苗；以长期继代黑木相思愈伤组织为基本材料。建立了黑木相思细胞悬浮培养细胞系。主要研究结果如下：1．黑木相思无菌体系的建立。比

2、较几种不间的黑木相思种子前处理方法，采用1．84g／mL浓硫酸处理10min．种子发芽率达到86．7％；然后采用常规消毒O．1％升汞处理15min，可以使污染率控制在6％；接种到MS+I玑活性炭培养基中，生长状况良好。2．黑木相思芽苗增殖培养。采用正交试验设计，考虑不同植物生长素对黑木相思芽苗增殖的影响，筛选出一代培养基为附加1．0mg／L6-BA、1．0mg／gKT和0．4me∥'LIBA的MS培养基，30d后增殖数可以达到3．15；二次继代时采用MS+0．4mg，LKT+O．4mg／LIBA+20g／L蔗

3、糖；壮苗培养基选择MS+0．2m叽IBA+15g／L蔗糖。3．黑木相思试管苗生根和移栽。采用正交试验设计，考虑不同种类和浓度生长素对黑木相思无菌苗生根的影响，筛选出生根培养基的配方为I／2MS+0．4mg／gIBA+o．2mg／LIAA+15grg蔗糖；移栽基质选择黄心土：泥炭土=2：1，移栽后一个星期内是移栽成活的关键时期，注意保持叶片水分平衡，移栽成活率可以达到80％以上。4．黑木相思愈伤组织体系的建立。以4个种源黑木相思种子无菌萌发下胚轴为诱导愈伤组织基本材料．筛选出诱导愈伤组织的培养基为1_0me,a

4、,2，4一D2．0mg／LBA的Ms培养基，诱导率为95％；愈伤组织继代培养基选择0．5mga．2，4一D、2．0me／LBA、300meJLLH的MS培养基与2．0mWLBA、1．0mWLKT、I．0m#LNAA、300mWLL{I的Bs培养基交替培养。5．黑木相思愈伤组织培养再生植株。以长期继代黑木相思愈伤组织为基本材料，在光照条件下，在含有1．0m#LBA、1．0mg儿KT、0．5mg／LNAA和300m#LLH的MS培养基中·可以便愈伤组织的分化率达到30％：分化愈伤组织在1．0mg／L8A、0．sm

5、g／LNAA和0．1m叽GA的培养基上，再生率44％。6．黑木相思悬浮细胞系的建立。考虑培养起始接种量、继代周期、蔗糖含量、AgN03等培养条件等对悬浮细胞的生长有重要影响。以MS为基本培养基．附加0．5mgCt．2，4-D、2．0mgrLBA的10mL液体培养基中加入O．2mL密实体积的愈伤组织，30d可以建立稳定的细胞悬浮系，7d继代一次。关键词t黑木相思；离体培养；愈伤组织；悬浮细胞培养；植株再生黑木相思离体培养与再生系统的建立InvitroCultureandEstablishmentoftheReg

6、enerationSysteminAcaciameianoxyzDnAbstractAcaciamelanoxylonisoneofthemaintimbertreespeciesinSouthChinawhichisimportedinrecentyears．Ithasgoodadaptation，highyield，andmanyotherUSeS．Inthisexperiment，chose4provenancesofblackwood’sseedsasbasicmaterial，researcheda

7、bouteverystepsofseedsaxenicbourgeon，proliferation，rootinginduction，transplantationetc．Analysedthekeyfactorsofproliferationandrooting；Seeds’shypocotyl．wereusedastheinitialmaterialfortheinducementofcalli，4provenancesblackwood’Scallisystemswereestablished，andp

8、olarizedseedlingfromcalli；andthenthepreliminarystudyofceUsuspensioncultureonblackwood．Themainresultsweredescribedasfollows：Theestablishmentofblackwoodaxenicsystem．Blackwood’SseedcapsuleWasrigidandcompa