紫娇花花蕾离体培养及再生体系的建立

《紫娇花花蕾离体培养及再生体系的建立》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据北方园艺2010(16)：151～154·生物技术·紫娇花花蕾离体培养及再生体何月秋，祝志勇，章丰涛(宁波城市职业技术学院，浙江奉化315502)系的建立摘要：以花蕾为外植体，首次建立了紫娇花离体再生体系。结果表明：用0．1％的HgCIz处理紫娇花花蕾lomin是较好的灭菌处理方式，污染率可控制在8．33％；而成活率相对较高，为33．33％。紫娇花花蕾在MS+NAA0．5mg／L+6-BA3rng／L的诱导培养基中可形成再分化能力强的、疏松、淡黄的高质量愈伤组织，且诱导率为50．79％。适宜浓度6-BA和N从的配比是紫娇花愈伤组织形成小鳞

2、茎的关键，在MS4-6-BA3rng／L+NAA0．2mg／L培养基上，小鳞球分化率达到98．2％，同时形成的小鳞球能较快的增殖。紫娇花试管苗适宜的生根培养基为1／2MS+NAA0．1mg／L，生根率可达i00％，且紫娇花组培苗移栽1个月后成活率可达到95％以上。关键词：紫娇花；花蕾；愈伤组织；再生体系中图分类号：S682．29文献标识码：A文章编号：1001--0009(2010)16—0151一04紫娇花(而z施办缸violacea)，别名野蒜或非洲小百合，原产南非，为石蒜科紫娇花属多年生常绿球根花卉。该植物成株丛生状，株高45～60cm；叶

3、狭长线形，光滑，深绿色，含韭味；细长而直立的花茎自叶丛中抽出，顶端着生数十朵淡紫色小花，颇为美丽。伞形花序高于叶丛10cin以上，小花淡紫色，长2cm，具香味。喜高温，也耐低温(一10℃)，生长的适温为24～30℃，较耐土壤瘠薄。适宜庭院栽植、盆栽或切花。紫娇花在华东地区5月开花，花期延续到11月。近年来紫娇花凭借其独特的观赏价值以及较强的适应性在园林绿化中应用广泛[1]。但由于传统的分株繁殖和播种繁殖方式，使其增殖系数低，增殖周期长，故而市场缺I=I较大。查阅国内外文献资料关于紫娇花组培快繁研究未见报道。组织培养技术是大量快速繁殖紫娇花的有效途

4、径，也是植物进行遗传改良的重要基础。因此，探索紫娇花的组培关键技术，实现其规模化繁殖，不但可丰富园林绿化植物品种，满足市场需求，也对石蒜科其它植物的组培技术研究具有重要的借鉴意义。1材料与方法外植体材料的处理：于2008年8月在宁波鄞州绿城园艺花卉培育基地用剪刀将盆栽紫娇花花蕾小心剪下，带回实验室。先用洗洁精浸泡15min，后用流水冲洗4～5次。分装好后移至超净工作台采用不同的灭菌方法进行处理，以获得最佳的灭菌方法，具体见表1。将第一作者简介：何月秋(1975一)，女，四川成都人，博士，讲师，现主要从事植物组织培养研究工作。E-trail．．he

5、yueqiu．．2004@1吼eonl。基金项目：宁波市农业科研攻关资助项目(2009c10019)。收稿日期：2010—05—25不同灭菌方法处理的外植体，接入培养基MS0培养基中，每天观察外植体的污染状况作好记录。接种10d以后，确定最佳的灭菌方法。紫娇花花蕾愈伤组织的诱导：将花蕾接种至MS分别添加6-BA为3rag／L，NAA为0．05、0．1、0．3、0．5、1．0mg／L的诱导培养基中。自接种后，每隔5d观察并记录外植体的生长状况、愈伤组织的诱导情况，统计不同外源激素配比下的愈伤组织诱导率。紫娇花愈伤组织分化培养：按二因子完全随机设计，

6、将诱导形成的愈伤组织转入附加不同浓度6一BA0、2、3、5rag／L，NAA为0,0．1、0．2、0．5mg／L的分化培养基中进行培养，从中筛选出比较适合的生长调节物质浓度，每5d观察并记录小鳞茎分化状况。紫娇花小鳞茎的生根培养：待小鳞茎长至2cm左右，将其转入1／2MS添加NAA浓度为0、0．05、0．1、0．15、0．2mg／L的生根培养基中，每5d观察并记录小鳞茎生根情况。表l不同灭菌方法中灭菌剂种类及处理时间注：⋯-．／已选吠荫荆·“一”未选灭菌刑．以上培养基中除生根阶段蔗糖的浓度为1．5％之外，其它阶段蔗糖均为3％，琼脂为0．70A，p

7、H5．8。培养室内控制恒温(25±1)。C，光照为40肚m01．m-2·s～，光照时间14h／d。3～5次重复，每个试验包括30"-70个外植体，数据采用SPSs软件进行分析。愈伤组织诱151万方数据·生物技术·北方园艺2010(16)：151～154导率(％)=分化芽数(个)／接种芽数(个)×100％；愈伤组织分化率(％)=分化愈伤组织数(块)／接种愈伤组织数(块)X100％进行计算。2结果与分析2．1紫娇花无菌体系的建立紫娇花花蕾属比较幼嫩的器官，经过消毒剂处理后死亡率较高，无菌体系不易建立。分别采用了6种灭菌处理方法，具体见表2。采用乙醇与

8、HgC]。组合、单独使用HgCl：均可获得少量无菌的外植体。当HgCl。处理时间不变，随着乙醇处理时间加长，虽然外植体污染率有所下降，但