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《猪血清免疫球蛋白IgG的分离纯化及抗大肠杆菌作用》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、试验研究2015年第36卷第7期总第484期猪血清免疫球蛋白IgG的分离纯化及抗大肠杆菌作用■孟腾飞韩愈杰王敬魏萌吴国江(河北农业大学生命科学学院,河北保定071000)摘要:试验旨在从猪血清中分离纯化得到纯度较高的免疫球蛋白IgG。试验采用硫酸铵分步沉淀法从猪血清中粗提猪血清免疫球蛋白,经DEAE52凝胶柱进行纯化,将纯化得到的免疫球蛋白进行SDS-PAGE电泳检测,并通过紫外分光光度计法测定其含量。试验结果显示,粗提可以得到免疫球蛋白IgG,纯化后的lgG经SDS-PAGE电泳检测,检测出两条带,分别为IgG的重链和轻链,分子量分别为56
2、.72kD和26.58kD,通过紫外分光光度计法测得的IgG浓度为2.577mg/ml。结果提示,从猪血清中能分离纯化到免疫球蛋白IgG,为实际工艺化生产提供理论依据。关键词:免疫球蛋白;硫酸铵沉淀法;DEAE52凝胶柱;SDS-PAGE电泳doi:10.13302/j.cnki.fi.2015.07.008中图分类号:S816.75文献标识码:A文章编号:1001-991X(2015)07-0034-04SeparationandpurificationofIgGfrompigserumandthedeterminationofconcen
3、trationMengTengfei,HanYujie,WangJing,WeiMeng,WuGuojiangAbstract:ThepurposeofthepresentstudywastoseparateandpurifyIgGfrompigserum.We作者简介:孟腾飞,研究方向为饲料微生物学。extractedpigserumimmunoglobulin(IgG)byus⁃通讯作者:吴国江,副教授,硕士生导师。ingtheammoniumsulfateby-stepprecipitation收稿日期:2014-11-10method
4、.AfterbeingfilteredbyDEAE52gelcol⁃?????????????????????????????????????????????????丝霉素蛋白可大量表达,分离纯化简便。此方法的建参考文献立,为后续大规模工业化生产奠定了基础。[1]潘虎,刘纯传,张礼华,等.我国部分地区奶牛乳房炎的病因及发饲料行业中应用防御素,以天蚕素研究最早,主病情况调查[J].中国兽医科技,1996(2):16-17.[2]伍义行,黄利权.奶牛乳腺炎防治的免疫学和药理学机制[J].乳要针对革兰氏阴性菌有抑制作用,能提高母猪产仔业科学与技术,
5、2001,24(4):37-43.率、解决仔猪腹泻等问题。防御素应用于治疗和预防[3]廖启顿,杨再波,黄光红,等.奶牛临床型乳腺炎的综合防治[J].牛乳腺炎,是近十几年新兴的研究热点,如Marcus发上海畜牧兽医通讯,2013(3):41-43.现两种活性多肽A70和A53,可抑制从牛乳腺炎中分[4]P.H.Mygind,R.L.Fischer,etal.Plectasinisapeptideantibiot⁃离到的金葡和链球菌,有治疗牛乳腺炎的应用前景[7]。icwiththerapeuticpotentialfromasaprophyti
6、cfungus[J].Na⁃ture,2005,437(13):975-980.我们发现菌丝霉素在体外有对预防和治疗牛乳腺炎[5]X.L.Jing,X.Luo,W.J.Tian,etal.High-LevelExpressionofthe的作用,属于首次报道。AntimicrobialPeptidePlectasininEscherichiacoli[J].CurrMicro⁃4小结biol,2010,61:197-202.通过毕赤酵母表达的真菌防御素——菌丝霉素[6]J.Zhang,Y.Yang,D.Teng,etal.Expression
7、ofplectasininPich⁃iapastorisanditscharacterizationasanewantimicrobialpeptide在体外对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌等革兰氏阳性againstStaphyloccocusandStreptococcus[J].ProteinExpression菌有很好的抑制作用,对温度、酸碱都比较稳定,在牛andPurification,2011(78):189-196.体内灌注后能够预防和治疗牛的急性乳腺炎,也可作[7]MarcusLı'vioVarellaCoelho,Janaı'na
8、dosSantosNascimento,为外用杀菌剂喷洒到环境、挤奶用品上,是新一代安Patrı'ciaCarlinFagundes,etal.Activityof