外源植酸酶对饲料钙-磷体外消化率的影响

外源植酸酶对饲料钙-磷体外消化率的影响

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1、《饲料工业》·2005年第26卷第20期酶技术外源植酸酶对饲料钙、磷体外消化率的影响孙育平左君摘要试验在体外条件下,通过胃蛋白酶和胰蛋白酶两步消化法研究了不同水平的外源植酸酶对饲料中钙和磷利用率的影响。结果表明:添加外源植酸酶可显著提高豆粕、花生粕和菜粕中钙和磷的释放量(P<0.01),但对大麦和高粱中无机磷的释放没有显著影响(P>0.01)。其中豆粕、花生粕以及菜粕中钙和磷的释放量随植酸酶添加量的增加而呈线性增加。最后,还构建了饲料中无机磷释放量的预测模型:y=-0.5971+0.0004x(R21+0.133

2、9x2-0.0526x3=0.78,P<0.01)。关键词植酸酶;钙;磷;体外;消化率中图分类号S816.32常用的植物性饲料中磷是以植酸磷形式存在的,ameresco,BE2189,≥250NFU/mg,由北京华美公司分很难为猪等单胃动物消化利用,大部分随粪便排出体装;透析袋:SigmaChemical,EI90003,直径21mm,透外而损失,造成世人关注的磷的环境污染(韩延明,析分子<12000MW,由北京华美公司分装;饲料样品:1994)。植酸盐中的磷通过螯合作用可降低动物对钙、大麦、高粱、花生粕、菜粕、

3、豆粕。锌、锰、铁、钾以及蛋白质等的利用率。猪对植酸磷的1.2试验设计有效利用,依赖于可将植酸盐分解的植酸酶(Phytase)试验设7个处理水平,即一个对照组(空白组),6的存在。但在猪体内天然存在的这种酶含量极微或几个植酸酶处理组,添加量分别为250FTU/kg、500FTU/kg、乎没有,因而猪本身并不能利用植酸磷。外源微生物750FTU/kg、1000FTU/kg、1250FTU/kg、1500FTU/kg。植酸酶是降解植物性饲料中植酸及其盐类的一种脂1.3透析方法酶,可促进饲料中植酸和植酸盐的分解。生长猪日

4、粮本试验方法参照Liu等(1997)和Zyta等(1999)中添加外源植酸酶,可显著提高磷的沉积量,减少粪建立的胃蛋白酶和胰蛋白酶两步透析袋法设计。中磷排泄量(Lei等,1993)。体内法评定饲料中磷的有1.3.1胃蛋白酶消化期效率具有客观、可靠等优点,但耗时、费资、十分繁琐。准确称取1.000g待测饲料样品,每组试验设4个为此,寻求一种体外试验方法来测定饲料中磷的消化重复,放入10ml玻璃试管中,加入2ml浓度为2000NFU/ml率,以此来评价磷的营养价值显得十分必要。本试验的胃蛋白酶溶液,用0.50N盐酸溶

5、液调节pH值至通过体外透析的方法模拟动物胃肠道消化环境,研究2.5,将食糜混合均匀后,封口,放入35℃的恒温水浴不同水平的植酸酶添加量对植物性饲料中钙、磷消化振荡器内消化100min(放入5min后开始计时)。率的影响。1.3.2胰蛋白酶消化期1材料与方法采用半透膜透析法,将经过胃蛋白酶消化后的食1.1试验材料糜用1M的NaHCO3溶液调至pH值为6.5,加入0.5ml液体植酸酶:酶活为5000FTU/ml,由广州丹尼斯浓度为0.65mg/ml的胰蛋白酶溶液,混合均匀。为了使克公司提供;盐酸、碳酸氢钠、巴比妥钠、

6、氯化钠、乙酸钠、样品无损转入透析袋中,用10mlpH值为6.5的巴比磷酸氢钙、硝酸、钒钼酸胺、偏钒酸胺试剂均为分析纯妥钠缓冲溶液冲洗试管5次,将冲洗液倒入透析袋。的国产试剂;胃蛋白酶:ameresco,BE1766,3000~3扎紧透析袋,然后将透析袋放入盛有100ml巴比妥钠500NFU/mg,由广州远迪公司分装;胰蛋白酶:缓冲溶液的三角瓶中,密封后于35℃的恒温振荡器中振荡(120~180r/min)透析6h。1.3.3透析液中磷的测定透析液中磷含量测定采用钼黄比色法。其中,豆孙育平,烟台师范学院生命科学学院

7、,助教,264025,山东省烟台市芝罘区184号。粕、花生粕和菜粕体外消化后对透析液中无机磷含量左君,单位及通讯地址同第一作者。测定时,显色反应有沉淀产生而出现浑浊现象,影响收稿日期:2005-05-24样品的吸光度值,需在4000r/min条件下离心15min,19酶技术孙育平等:外源植酸酶对饲料钙、磷体外消化率的影响然后测定其吸光度。透析液中钙的测定采用EDTA络2.1植酸酶对饲料中磷体外透析率的影响合快速滴定法。各添加水平对饲料中磷体外透析率的影响见表1.4测定指标1。从表1中可以看出,经植酸酶处理后的大麦

8、无机磷饲料和透析液中钙、磷含量。释放量没有明显增加(P=0.90),高粱无机磷释放量也1.5透析率计算方法没有明显增加(P=0.79),但可以极显著增加花生粕饲料中磷的透析率按下列公式计算:(P<0.01)、菜粕(P<0.01)、豆粕(P<0.01)中无机磷的释透析率(%)=[D/(W×A)]×100%放量。由图1可知,随着植酸酶添加量的增加,花生粕式中:D——透析液中可

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