人参皂甙Rh2对SP2O骨髓瘤细胞的作用及其机制的初步探讨

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1、中文摘要人参皂贰Rh:对SP2/O骨髓瘤细胞的作用及其机制的初步探讨摘要多发性骨髓瘤(Multiplemyeloma,MM)是危害人类生命与健康的恶性疾病之一，是来源于终末分化的B淋巴细胞的恶性肿瘤，以患者骨髓中大量的浆细胞克隆性增生为主要特征，其主要特点是大量单克隆免疫球蛋白的产生和广泛的骨质疏松。骨髓瘤的发生与多种细胞因子有关系，如白细胞介素6、肿瘤坏死因子a(TNFa).胰岛素生长因子结合蛋白4、巨噬细胞炎症蛋白一la(MIP-la)。研究表明这些因子在骨髓瘤细胞的生长、发育过程中起着重要作用，且能刺激破骨细胞的

2、形成，与骨髓瘤骨病的发生及预后有着密切的关系，浓度越大，预后越差。因此通过药物抑制这些因子产生，可以减轻骨髓瘤患者的症状，改善生活质量及预后。人参皂贰(Ginsenoside,G)是五加科人参属植物的主要活性成分，具有抗衰老、抗疲劳、抗血小板聚集、抗辐射等多种生物功能。随着研究的深入，该类化合物在癌症的预防和治疗方面具有较强的活性。人参皂贰可通过多种机制发挥其抗肿瘤活性，如直接抑制瘤细胞的生长;诱导瘤细胞的凋亡及分化;作用于肿瘤侵袭的多个环节抑制肿瘤的转移;逆转耐药，提高化疗药物敏感性;影响细胞内多种酶活性;也可通过影

3、响代谢和调节免疫功能，增强机体对疾病的抵抗能力，从而间接抑制肿瘤的生长。人参皂试可作用于多种肿瘤细胞，但其对于骨髓瘤细胞的作用尚未见到有关报道。中文摘要目的:本研究拟观察人参皂贰单体成份Rh2(G-Rh2)对于骨髓瘤细胞SP2/O的作用并对其可能的机制进行了初步探讨。方法:对SP2/O细胞株进行传代培养后，将细胞接种培养板中，利用MTT法检测G-Rh2对SP2/O细胞增殖抑制作用;利用流式细胞术检测各组细胞凋亡率及细胞周期的变化;常规Giemsa染色和DAPI荧光染色后观察凋亡细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细

4、胞的DNA梯带。利用酶链免疫吸附(ELISA)法，测定药物干预对于TNFa,MIP-1a细胞因子产生的影响。结果:1.G-Rh:能抑制SP2/O细胞增殖。在一定浓度范围内，呈剂量、时间依赖性:Rh2作用72小时后，logg/ml至120[g/ml组均能抑制细胞生长增殖，与Olg/ml组相比有显著差异(P<0.05)，且随着浓度增加，其抑制细胞增殖的作用增强。2.G-Rh2干预后不影响SP2/O细胞TNFa的产生。G-Rh2作用24,48小时后，20Ag/ml组至l00Ag/ml组，与Ogg/ml组相比，TNFa的产生无

5、显著差异(P>0.05).3.G-Rh2可抑制SP2/O细胞MIP-1a产生。G-Rh2作用24,48小时后，20wg/ml至100Pg/ml，与OAg/m}组相比MIP-1a产生有显著差异(P<0.05)，且呈剂量依赖性。4.G-Rh:可诱导SP2/O细胞凋亡。药物处理后收集各组细胞，用流式细胞仪检测细胞凋亡率。24小时后，20ig/ml与Oug/ml组比较无显著差异(P>0.05),40l.g/ml组至I00Ag/ml组凋亡率高于。IMP/rfl组(P<0.05).48小时后，20gg/ml组至l00fg/ml组均

6、高于Ogg/ml组(P<0.05)。z中文摘要5.G-Rh2作用24,48小时后，S期细胞明显增加，各组与Olg/ml组比较有显著性差异(P<0.05).6.G-Rh:干预后，SP2/O细胞出现染色质浓缩、空泡、边缘化及凋亡小体等细胞凋亡的形态学变化。7.G-Rh2干预后，琼脂糖凝胶电泳出现凋亡细胞DNA梯带。结论:1.G-Rh:可抑制SP2/O细胞增殖。2.G-Rh2可促进SP2/O细胞凋亡，使SP2/O细胞阻滞于S期。3.抑制MIP-la产生，可能是G-Rh2抗骨髓瘤细胞的作用机制之一。关键词:人参皂贰Rh2;多发

7、性骨髓瘤;巨噬细胞炎症蛋白一la;肿瘤坏死因子a;细胞凋亡.-一一目一一一-月户一一一一，一~~3英文摘要ThestudyontheeffectsofGiesenosideRhzonSP2/OmyelomacellsanditsmechanismABSTRACTMultiplemyeloma(MM)istheprototypeofaclonalB-celltumorofdiferentiatedandusuallyproliferatingplasma.Thisdisorderisfrequentlyaccompani

8、edbymonoclonalproteinproductionanddiffuseosteoporosisorlyticbonelesionsItisoneofthemalignantdiseasesforhumanbeing.Theoccurrenceofmyelomahasrelationshipwithmanycytokin