MoFlo XDP 流式细胞仪简要操作步骤-培训手册 v

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1、BeckmanCoulter公司MoFloXDP培训材料一、培训大纲二、仪器简介和用途三、适用范围四、样本制备方法推荐五、软件常用操作步骤六、分选高级技巧七、触摸屏界面八、开机、光路和流路检查和清洗九、分选设置所有操作步骤和界面说明请参看INSTRUCTIONFORUSE联系方式报修电话：021-38651114应用技术支持：游东生13636440348维修技术支持：张洪涛13601981302贝克曼库尔特商贸中国有限公司总机：021-38651000，传真：021-68753929福山路500号城建国际中心1201，1208-1210室MofloX

2、DP用户培训大纲装机培训目的ò掌握MoFloXDP流式细胞仪分选系统的原理和ò掌握MoFloXDP开关机程序及常规保养结构ò掌握Summit软件获取、分析、分选方法ò掌握流式细胞术标记原理和方法，掌握样本制ò掌握MoFloXDP光路检查和调节备流程ò掌握MoFloXDP分选设置和分选操作培训内容及时间安排第一天：6，分选设置和细胞分选1，MoFloXDP流式细胞分选系统的原理和结构¾液滴形成¾分析和分选原理¾分选流路¾MoFloXDP的结构和特点¾液滴延迟时间确定¾分选逻辑选择和设立2，MoFloXDP开关机和保养¾分选细胞收集¾开关机程序¾分选统计

3、结果解读¾消毒程序¾纯度测定¾鞘液和废液更换方法¾克隆分选3，Summit软件介绍第三天：¾建立数据库¾菜单7，光路校正¾方案建立¾激光器光路¾调取文件分析¾流动池位置¾更换流动池4，光路检查¾鞘液压力调节¾准备微球¾激光延迟校正¾结果判定8，克隆分选5，细胞标记和检测¾孔板分选¾抗体介绍¾玻片分选¾抗体标记的策略和方法¾溶血第四天：¾设门和建立逻辑关系¾单色及多色标记的电压和补偿设置9，全部过程练习¾检测结果解读10，答疑¾图形和数据输出11，培训测试第二天：仪器简介和用途一、仪器简介和用途BeckmanCoulter公司MoFloXDP是世界上顶

4、级的高速分选型流式细胞仪，可以对样本中特定的细胞进行定量（所占百分比、单细胞表面相对蛋白表达强度等），并对目标细胞进行分选纯化（据标记情况可达99%以上的纯度）。分选纯化后的细胞活性高，细胞状态好，可进行下游的细胞培养、功能测定、动物试验和RNA/DNA/蛋白抽提等工作。MoFloXDP可对样本中任意含量的目标细胞进行分析和分选（国内应用的下限目前低至十万分之一的目标细胞），样本单次获取和保存的细胞量可高达10亿个。分选速度为70000细胞/秒时仍保持高纯度，硬件丢弃（HardAbort或ElectronicAbort）的比例低于5%，保证样本中目标

5、细胞的高回收率。MoFloXDP配置为：ò激光系统¢488nm氩离子固体激光，-200mW¢UV（355nm）固体激光，100mW¢635nm氦氖激光，25mW¢其它激光器（可选）ò滤光片系统¢488nm激光：FSC/SSC/525nm/575nm/620nm/675nm/770nm¢UV激光：450nm/675LongPass¢635nm激光：670nm/750LP¢其它激光器滤光片ò喷嘴大小：70um，100um或其它大小喷嘴ò样本上样管适配器：0.5ml离心管，1.5ml离心管，12mmX75mm普通流式管，15ml和50ml离心管ò分选细胞收

6、集管适配器：0.5ml离心管，1.5ml离心管，12mmX75mm普通流式管，6-1536孔板，玻片ò可同时进行四路分选、6-1536孔板单细胞或任意制定细胞数分选、玻片任意矩阵分选ò提供上样时温度控制装置和气溶胶防护装置适用范围ò最佳检测和分选细胞大小范围：0.2—30umò细胞种类：真核细胞（组织分离细胞、细胞系、大病毒颗粒、细菌、酵母、血液、骨髓、体液细胞等）ò可应用的荧光素标记物：FITC/GFP/CY3/YFP/PE/ECD/PI/PE-CY5/PerCP/TC/PE-CY7/APC/APC-CY7/HOECHST33342/DAPI/FL

7、UO-2/FLUO-3/AlexaFluo系列及任何符合上述激发光及发射光检测滤片的荧光素ò主要应用：¢基于细胞表型的分析分选¢基于细胞浆或细胞核（胞内）蛋白的分析分选¢基于DNA倍体的细胞周期分析分选¢基于代谢（如SidePopulation，SP）细胞的分选¢常见实验方法：荧光蛋白转染、肿瘤干细胞和其它干细胞、细胞免疫功能、细胞周期、细胞凋亡、细胞信号传导、细胞器研究等。有标记物的几乎任何细胞的分析分选都可以进行。样本制备推荐方法ò实验准备阶段：¢目标细胞的MARKER,对应的抗体和荧光选择：了解需要检测的目标细胞的特异性标记和对应的抗体,选择商

8、品化的抗体(荧光标记或未标记,合适的荧光素或二抗)¢选择合适的荧光和抗体对照ò样本处理¢必须是单细胞悬液.外