HIF1a和COX2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

《HIF1a和COX2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、HIF．1Q幂ncox．2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义摘要目的：通过检测HIF．1a和COX．2在非小细胞肺癌(NSCLC)及正常肺组织中的表达，初步探讨它们在非小细胞肺癌(NSCLC)的发生、侵袭和转移中的作用。方法：用免疫组织化学SP法检测30例手术切除的非小细胞肺癌(NSCLC)组织(鳞癌15癌，腺癌15例)和30例正常肺组织中HIF．1a和COX．2的表达水平。NSCLC组织均为手术切除获得，术前患者未作任何放疗或化疗。30例正常肺组织作对照。将组织标本经10％福尔马林固定，石蜡包埋，常规49in连续切

2、片。将石蜡切片常规脱蜡至水后，蒸馏水冲洗，磷酸盐缓冲液(phosphatebuffersaline，PBS)浸泡5min。高压热修复抗原，用3％过氧化氢甲醇液9呼育10rain以消除内源性过氧化酶活性。用正常山羊血清封闭交叉反应引起的非特异性着色。滴加一抗(HIF．1et兔抗人多克隆抗体的稀释度1：200；COX一2兔抗人多克隆抗体稀释度l：50)孵育，PBS冲洗后，用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。滴加生物素标记二抗孵育，PBS冲洗后滴加辣根酶标记链酶卵白素工作液(S-MHRP)孵育，PBS冲沈后，DAB显色，May

3、er苏木精溶液轻度复染，酸化，蓝化，梯度脱水，透明，封片，显微镜观察。注意控制背景。以细胞浆或者细胞核内出现棕黄色颗粒或者棕黄色团块为阳性细胞。HIF．0c的阳性信号主要位于细胞核中，部分位于细胞浆中，细胞间质中也可见表达：而COX．2的阳性表达信号主要位于细胞浆中。按每张切片阳性细胞比例数、着色深浅划分为．、+、++、卅共四个l等级。基本不着色或者着色细胞少于5％为(．)，着色浅淡或者着色细胞占整张切片5％～25％为弱阳性(+)，着色适中或者着色细胞占整张切片26％～50％中度阳性(++)，着色深或者着色细胞占整张切

4、片超过50％强阳性(卅)。结果：HIF．1a和COX．2在NSCLC中的表达明显高于正常肺组织(尸<0．01)，但它们的表达与患者的年龄、组织分化程度、TNM分期、病理类型、吸烟、性别及有无咳血等临床病理因素无关(胗O．05)。在NSCLC中，HIF．1et和COX．2的表达呈正相关，有明显统计学意义(尸O．4ll，P<0．05)。结论：(1)在NSCLC中存在HIF．a和COX．2的过度表达，均明显高于正常肺组织，说明两者可能均参与了非小细胞肺癌的致癌过程。(2)H1F．1a蛋白、COX．2蛋白在非小细胞肺癌组织的表

5、达与患者的年龄、组织分化程度、TNM分期、病理类型、吸烟、性别及有无咳血等临床病理因素无关，提示他们与非小细胞肺癌的进展、侵袭和转移可能无关，或者关系不大。(3)HIF．1a蛋白、COX．2蛋白在非小细胞肺癌组织的表达成正相关，有统计学意义(严0．411，P<0．05)，提示HIF．1et、COX．2蛋白的表达，可能共同促进细胞的恶性转化，从而促进非小细胞肺癌的形成。关键词：HIF．1O【；COX．2；非小细胞肺癌TheexpressionofHIF—laandCOX一2proteininnon．smallcelllu

6、ngcarcinomaanditsclinicalsignificanceAbstractObjective：TostudypreliminarilytheeffectsofHIF·-laandCOX．．2intheoccurrence，invasionandmetastasisofnon—smallcelllungcancer(NSCLC)bydetectingtheexpressionoftheminnon．smallcelllungcancer(NSCLC)andinnormallungtissue．Method

7、s：TodetectHIF．1aandCOX··2expressionlevelin30casesofnon-smallcelllungcancer(NSCLC)tissuesfromsurgicalresection(15squamouscarcinoma，15adenocarcinoma)and30casesofnormallungtissuebyimmunohistochemicalSPmethod．NSCLCtissueswereobtainedbysurgicalresectionfrom30NSCLCpat

8、ients，withoutanyradiotherapyorchemotherapybeforesurgeries．30controlswerenormallungtissues．The孽．。tissuesamplesweredealedwithbythe10％formalin—fixation，paraffin—embeddin