实验9高温对植物细胞膜的伤害

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1、实验九高温胁迫对植物细胞膜的伤害1.实验目的■学习电导仪法测定膜相对透性的方法■理解逆境对植物膜透性的影响植物细胞膜起调节控制细胞内外物质交换的作用，它的选择透性是其最重要的功能之一。当植物受到逆境影响时，如高温或低温，干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜的透性增加，选择透性丧失，细胞内部分电解质外渗，将植物组织浸入去离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大，伤害愈重，外渗愈多，电导率愈大。膜结构破坏的程度与逆境的强度、持续的时间、作物品种的抗性等因素有关。因此，质膜透性的测定常可作为逆境伤害的一个生

2、理指标，广泛应用在植物抗性生理研究中。本实验采用电导率法测定电解质的相对外渗率，来了解胁迫情况下植物受害的程度。2.实验原理当质膜的选择透性被破坏时细胞内电解质外渗，其中包括盐类、有机酸等，这些物质进入环境介质中，如果环境介质是蒸馏水，那么这些物质的外渗会使蒸馏水的导电性增加，表现在电导率的增加上。植物受伤害愈严重，外渗的物质越多，介质导电性也就越强，测得的电导率就越高（不同抗性品种就会显示出抗性上的差异。）本实验采用电导率法测定电解质的相对外渗率，来了解胁迫情况下植物受害的程度。伤害率本次实验测定高温对植物细

3、胞膜的伤害电导率K=GQQ:电极常数（电导仪本身决定）G:实测电导值伤害率（％）＝处理电导率煮沸电导率×100％3材料、仪器设备及试剂（一）材料：梧桐叶片；（二）仪器设备：1.电导仪；2.打孔器；3.真空干燥器；4.恒温水浴锅；4实验步骤1)打取叶圆片：自选叶片，洗净吸干，避开叶脉打取30个叶圆片,放入1支试管,再打取30个叶圆片,放入另1支试管,依此类推,每支试管皆放入30个叶圆片；2)试管分别编号为：1A,1B,2A,2B……5A,5B，每管加入15ml纯水,抽真空20min；3)水浴处理：5组(1A1B,

4、2A2B……5A5B)分别在60℃水浴0，10，20，30，40min，取出后用自来水冷却10分钟；高温处理时间（min）CK（0）10203040重复11A2A3A4A5A重复21B2B3B4B5B4)测量电导率：用电导仪测定浸泡溶液的电导率（分组单独领取电导仪，详细使用方法分组指导）；5)煮沸电导率：测过电导率的10支试管再放入100℃沸水浴中15min，以杀死植物细胞，使细胞内物质全部渗漏出来，取出试管后用自来水冷却10min，测其煮沸电导率。电导仪的使用方法电源开关“开”，预热；打开（测量/校正）拨至“

5、测量”；（补偿/一般）拨至“一般”；（×1/×10-2）拨至“×1”；量程范围选“×103”，使待测值介于0.1～0.999之间。每次往待测液中插入电极时，都要首先用纯水冲洗电极，并用吸水纸轻轻拭干。处理电导率CtAB煮沸电导率C100AB伤害率（Ct／C100）×100AB伤害率平均值CK（0）10min20min30min40min5数据记录与处理表1高温对叶片伤害率的影响6实验结果及分析计算电导率时，取2支试管的平均值计算伤害率比较不同时间处理的叶片细胞透性的变化情况，记录结果，并加以解释以伤害率同处理时

6、间的关系作图7注意事项整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净（全部器皿要洗净），也不要用手直接接触叶片，以免污染；水浴加热隔几分钟摇一次，测量前也要摇匀；煮沸时单管要分开，否则沸水窜入试管；每次往待测液中插入电极时，都要首先用纯水冲洗电极，并轻轻拭干。