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1、蛋白质分离分析中的色谱技术新进展3鲁碧楠,许丽娜,韩旭,彭金咏(大连医科大学药学院,辽宁大连116044)摘要:蛋白质在食品、医药及生物等领域都有着重要的作用和广泛的应用,因此高效和高灵敏度的蛋白质分离分析成为现代药物分析、分析化学及生命科学研究的热点。本文就现代色谱技术、色谱光谱联用技术、以及相关的集成化技术在蛋白分离和分析中最新应用及进展作一简要的综述。关键词:蛋白质分离;色谱技术;色谱联用中图分类号:R917.101文献标志码:A文章编号:100727693(2009)1321116206RecentDevelopmentofC
2、hromatographicTechniquesinProteinSeparationandAnalysis3LUBinan,XULina,HANXu,PENGJinyong(CollegeofPharmacyinDalianMedicalUniversity,Dalian116044,China)ABSTRACT:Proteinisplayingaveryimportantroleinfieldsoffood,medicine,biologyetal,sothehighperformancedandhypersensitizedte
3、chniquesofproteinseparationandanalysisbecomethehotspotinmordenpharmaceuticalanalysis,analyticchemistry,andlifescience.Thisreviewintroducedtherecentapplicationsanddevelopmentofmodernchromatographictechniqueandmultipletechniquesofproteinseparationandanalysisconcisely.KEYW
4、ORDS:proteinseparation;chromatography;multipletechniques蛋白质是生命有机体的主要成分,在生命生长的不同,使其在两相中的分配不同而得以分离。低发育的各个阶段都起着很重要的作用。同时,蛋白pH值流动相、室温或较高的温度以及使用乙腈或异质产品在食品、药品、医学诊断及生物催化等领域也丙醇作为有机部分,三氟乙酸(TFA)作为离子对试有着广泛的应用。因此,进行蛋白的高效率和高灵剂更有利于蛋白质的分离。蛋白质的保留指数和选敏度的分离和分析研究是现代药物分析、分析化学择性还与键合固定相的性质有关
5、,大孔硅胶(20～及生命科学研究的热点领域之一。30nm)短链烷基(C4和C8)键合固定相适合于蛋白由于蛋白质的大小、形状、电荷、疏水性功能等质的分离;分子量相差较大和疏水性很强的蛋白质特性不同,加上现代高新工程技术的发展,就为蛋白混合物用无孔径载体柱分离效果很好,较高的柱温[1]质的分离和分析提供了多种方法。从传统的离心、还能改善蛋白质混合物的分离。JanineBMills等沉淀、结晶方法,发展到双水相萃取、反胶团萃取、膜利用反相高效液相色谱法一步纯化完整细胞中的重[2]分离以及色谱分离技术。近年来,一些新型的蛋白组体蛋白;Sand
6、raSantiago2Rivas等利用高效液相分离技术如蛋白质色谱、nano2液相色谱等以及多种色谱法分离纯化了蚌中的金属硫蛋白。分离方法的集成联用正在不断涌现出来。本文就蛋1.2离子交换色谱(IonExchangeChromatography,[324]白质的现代分离分析技术作一简要的综述。IEC)1现代色谱技术IEC是分离和检测蛋白质的一种重要方法。蛋1.1高效液相色谱法(HPLC)白质分子和离子交换剂(即固定相)之间的相互作高效液相色谱是溶质在固定相和流动相之间进用主要是静电作用,蛋白质分子在一定离子强度和行的一种连续多次的交换
7、过程,它借溶质在两相间pH值条件下所带电荷不同,介质表面的可交换离子分配系数、亲合力、吸附能力、离子交换或分子大小和与其带相同电荷的蛋白质分子发生交换,利用蛋不同引起的排阻作用的差别使不同溶质进行分离。白质分子交换能力的差别使蛋白质分子混合物得以[1]其中,反相高效液相色谱(RP2HPLC)是目前分离。HPLC分离中最常用的一种模式,其特点是固定相离子交换剂分为阴离子交换剂和阳离子交换剂的极性小于流动相的极性。蛋白质分子因其疏水性两大类。阴离子交换剂本身带碱性基团,蛋白质分3作者简介:鲁碧楠,女,硕士通信作者:彭金咏,男,教授Tel:
8、(0411)86110411E2mail:jinyongpeng2005@163.com·1116·ChinJMAP,2009June,Vol.26No.13中国现代应用药学杂志2009年6月第26卷第13期子在高于其等
