拟南芥IQM4调节ABA积累和信号的研究

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1、分类号学校代码:11078UDC密级学号:2111514017广州大学学位论文拟南芥IQM4调节ABA积累和信号的研究伍静辉学科专业(领域):遗传学研究方向:植物重要基因功能的研究与利用论文答辩日期:2018-05-25指导教师(签名):答辩委员会主席(签名):答辩委员会委员(签名):SortCodeUniversityCode:11078UDCSecretGradeNumber:2111514017GuangzhouUniversityMasterDissertationStudiesontheModulatingFunctionofArabido

2、psisIQM4inABAAccumulationandSignalingWuJinghuiSubjectMajor:GeneticsDirectionofStudy:FunctionalStudyandutilizationonPlantImportantGenesAnswerDate:2018-05-25Supervisor(Signature):AnswerCommitteeChairman(Signature):AnswerCommitteeCommitteeman(Signature):广州大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论

3、文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:日期:年月日广州大学学位论文版权使用授权书本人授权广州大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权广州大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印﹑缩印或扫描等复制手段保存﹑汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授

4、权书)学位论文作者签名:日期:年月日导师签名:日期:年月日摘要摘要脱落酸(abscisicacid,ABA)是调控种子休眠和萌发的主要植物激素。种子内源ABA含量和种胚对ABA的敏感性共同调控着种子休眠和萌发过程。课题组前期发现拟南芥IQM4参与ABA调控种子萌发过程,但其机制未知(萧文慧,2016)。本论文从以下五个方面开展研究:(1)分析拟南芥野生型Col和IQM4突变体种子休眠水平,并测定鲜种子内源ABA和GA3含量,旨在了解IQM4是否参与种子休眠调控;(2)采用RNA-Seq分析Col和iqm4-1种子转录组,旨在从转录组水平研究IQM4参

5、与种子休眠和萌发调控;(3)利用RT-qPCR分析IQM4表达谱,旨在从转录水平探究IQM4发挥功能的场所;(4)利用RT-qPCR分析种子成熟转录因子、ABA合成代谢酶基因及ABA信号转导基因的表达量,旨在从转录水平分析IQM4调控种子休眠和萌发的机制;(5)构建p35S:IQM4-HA转基因植株,旨在为研究IQM4互作蛋白提供实验材料。主要研究成果如下:(1)与Col相比,缺失突变体iqm4种子ABA含量显著下降,但GA3无明显差异,过表达突变体种子ABA和GA3均无明显差异;未经低温吸胀处理的新鲜iqm4种子萌发率明显高于Col,过表达突变体与

6、Col没有差异,经低温吸胀处理后所有种子萌发率一致。结果表明,IQM4通过影响ABA积累而调控种子休眠。(2)转录组的差异表达基因涉及ABA合成代谢与信号转导、GA合成代谢与信号转导、细胞壁结构组成、热激蛋白及热激转录因子等。(3)IQM4在拟南芥不同器官中均有表达,其中新鲜种子和干种子表达量最高;种子储存和低温吸涨及萌发后,IQM4表达量会不同程度地下降。(4)种子发育中期,IQM4缺失抑制了NCED6、NCED9、LEC1、LEC2、ABI3和ABI5的表达,促进CYP707A3表达;但IQM4过量表达抑制LEC1和LEC2表达。种子发育晚期,I

7、QM4缺失抑制NCED6、NCED9的表达,IQM4过量表达增强了NCED3、NCED9、CYP707A2、CYP707A3、ABI4和ABI5的表达。结果表明,IQM4突变改变了发育种子ABA合成代谢及信号转导相关基因的表达水平,IQM4具有促进种子发育期ABA积累的作用。I摘要(5)ABA处理的iqm4-1幼苗中,ABA负调控因子WRKY40表达量显著提高,但是ABA信号负调控因子ABI2、HAB1与HAB2以及ABA信号正调控因子ABI5和SnRK2.2的表达则受到明显抑制;ABA处理的IQM4过表达突变体幼苗中,ABI5表达量显著提高。结果表

8、明,IQM4正调控种子萌发过程中ABA的信号转导过程。(6)成功构建2个p35S:IQM4-HA纯合株系,为

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