细胞膜表面ATP5B的表达对肿瘤细胞侵袭转移能力影响的研究

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1、分类号：R36单位代码：10183研究生学号：2015712053密级：公开研究生学位论文吉林大学题目硕士学位论文（学术学位）作者细胞膜表面ATP5B的表达对肿瘤细胞侵袭转移能力影响的研究姓ThestudiesoftheeffectofATP5Bexpressionontheinvasionandmetastasis名oftumorcells作者姓名：唐辰晨专业：病理学与病理生理学指导教师：李一雷教授吉研究方向：肿瘤病理学林培养单位：基础医学院大学2018年5月细胞膜表面ATP5B的表达对肿瘤细胞侵袭转移能力影响的研究ThestudiesoftheeffectofATP5Bexpre

2、ssionontheinvasionandmetastasisoftumorcells专业名称：病理学与病理生理学指导教师：李一雷教授学位类别：医学硕士答辩日期：2018年5月28日未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用（但纯学术性使用不在此限）。否则，应承担侵权的法律责任。吉林大学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或

3、集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿声明研究生院：本人同意《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》出版章程的内容，愿意将本人的学位论文委托研究生院向中国学术期刊（光盘版）电子杂志社的《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿，希望《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》给予出版，并同意在《中国博硕士学位论文评价数据库》和CNKI系列数据库中使用，同意按章程规定享受相关权益。论文级别：■硕士□博士学科专业：论文题目：作者签名：

4、指导教师签名：年月日作者联系地址（邮编）：作者联系电话：中文摘要恶性肿瘤已经成为影响人类生存和健康的主要威胁，恶性肿瘤患者主要的死亡原因是肿瘤的转移，约有90%的恶性肿瘤患者因肿瘤转移而死亡。肿瘤转移的过程受诸多因素的影响，包括循环中受到免疫细胞攻击、血液-机械作用、器官微环境和肿瘤细胞活力等影响。转移是恶性肿瘤发生和演变过程中最难以控制和最危险的阶段，因此研究恶性肿瘤侵袭转移的相关机制，寻找相应阻断途径和潜在治疗靶点，对抑制恶性的肿瘤发生和发展发挥着重要作用。在课题组前期工作中，我们选用正常前列腺上皮细胞，前列腺癌低转移细胞系：PC-3细胞，前列腺癌高转移细胞系：PC-3M细胞，运

5、用噬菌体七肽库进行差减筛选，得到了只与PC-3M特异性结合短肽：B04，并发现短肽B04能够有效抑制PC-3M细胞的增殖与转移。随后，通过蛋白质组学等方法检测到了短肽B04的受体蛋白为PC-3M细胞膜上的ATP5B，并发现B04能通过特异性抑制PC-3M细胞膜上表达的ATP5B来抑制其侵袭能力。胆固醇（Cholesterol，Chol）可促进PC-3M细胞中ATP5B由线粒体异位至细胞膜。在本实验中，我们主要探究ATP5B是否在其它肿瘤细胞的细胞膜上异位表达，以及肿瘤细胞的细胞膜上ATP5B的表达对细胞迁移和侵袭能力的影响。实验结果：首先，检测ATP5B在人乳腺癌细胞MDA-MB-2

6、31和MCF-7，人宫颈癌细胞HELA和SIHA，人卵巢癌细胞H08910和SKOV3，人胃癌细胞BGC823和SGC7901的细胞膜上的异位表达采用免疫荧光细胞化学染色方法对ATP5B蛋白在MDA-MB-231、MCF-7、HELA、SIHA、H08910、SKOV3、BGC823、SGC7901细胞进行染色，结果显示ATP5B在这八种细胞膜表面均有表达。随后进一步采用流式细胞术方法检测ATP5B在各个细胞膜上的表达量，流式细胞术实验结果显示：ATP5B在MDA-MB-231和MCF-7细胞的细胞膜上阳性表达的百分比及荧光强度分别为25.57%±0.14%vs44.58%±3.28

7、%，23.79±0.12vs48.3±5.09,且统计学分析显示，两种细胞细胞膜上ATP5B阳性表达的百分比及荧光强度比较差异均具有统计学意义（P＜0.05）。以上结果表明ATP5B在IMDA-MB-231和MCF-7细胞膜上有表达，且在MDA-MB-231细胞膜上的表达量明显高于MCF-7细胞。同理，ATP5B在HELA和SIHA细胞的细胞膜上阳性表达的百分比及荧光强度分别为95.55±%1.09%vs79.79%±1.97%,58.79±8.54vs3