林蛙皮胶原蛋白_壳聚糖复合海绵的制备及体外致敏性评价

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1、林蛙皮胶原蛋白/壳聚糖复合海绵的制备及体外致敏性评价Preparationofforestfrogcollagen/chitosancompositespongeandinvitroallergenicityevaluation作者姓名：孙程程领域（方向）：食品加工与安全指导教师：卢静教授类别：农业推广硕士答辩日期：2018年5月28日中文摘要林蛙皮胶原蛋白/壳聚糖复合海绵的制备及体外致敏性评价本研究隶属于国家科技支撑计划项目-《特种资源加工技术集成与产品》（2013BAD16B09）。胶原海绵是将胶原蛋白与其他材料混合，经冻干、灭菌等工艺制成的海

2、绵状物质，能有效防止机械性创伤及伤口感染，具有良好的安全性，在生物材料领域有广阔的应用前景。林蛙皮是林蛙取油后的废弃物，其胶原蛋白含量丰富，具有开发成为胶原海绵的潜力。因此本论文在获得林蛙皮胶原蛋白的基础上，对林蛙皮胶原蛋白/壳聚糖复合海绵的制备工艺进行研究，并考察林蛙皮胶原蛋白/壳聚糖复合海绵的感官质量、部分物理性质及体外致敏性，为林蛙皮胶原海绵产品的开发提供实验依据，也为林蛙皮废弃物的综合利用提供新思路。论文首先考察了壳聚糖与胶原蛋白的质量比、戊二醛浓度对林蛙皮胶原蛋白/壳聚糖复合海绵吸水性能、机械性能和热稳定性的影响，结果发现壳聚糖与胶原蛋白

3、的质量比为1:1，戊二醛浓度为1.5%和2%时，复合海绵的吸水性能最好；壳聚糖与胶原蛋白的质量比为1:1，戊二醛浓度为1%时，复合海绵的机械性能最好；壳聚糖与胶原蛋白的质量比为1:2，戊二醛浓度为1%和2%时，复合海绵的热稳定性最好。然后，论文以壳聚糖与胶原蛋白的质量比、戊二醛浓度为实验因子，以吸水倍数、机械性能和热变性温度为指标，采用正交实验设计优化林蛙皮胶原蛋白/壳聚糖复合海绵的制备工艺。结果表明：采用壳聚糖与胶原蛋白质量比为1:1，戊二醛浓度为1%，4℃交联12h，可获得吸水性、机械性能和热稳定性较理想的胶原海绵。在该条件下，林蛙皮胶原海绵的

4、吸水倍数为5.22，断裂伸长率为10.96%，热变性温度为81.24℃。其次，论文对最佳工艺条件下获得的林蛙皮胶原蛋白/壳聚糖复合海绵的感官指标、部分物理性能和表面形貌进行了考察。结果显示：林蛙皮胶原蛋白/壳聚糖复合海绵为纯白色、弹性好、按后可缓慢恢复、表面平整、呈现天鹅绒状、组织纤维排列较为整齐、无聚集现象、无气泡；表观密度为9.58×10-3g/cm3、pH值为6.5；海绵孔径大小为200-400µm，网孔大小基本一致，排列有序，符合生物材料基本要求。I最后，论文采用RBL-2H3细胞模型，对林蛙皮胶原蛋白/壳聚糖复合海绵的体外致敏性进行考察。

5、结果表明，林蛙皮胶原蛋白单独作用于RBL-2H3细胞时，与空白组相比无显著性差异（P>0.05），说明林蛙皮胶原蛋白无致敏性；复合海绵与空白组相比有显著性差异（P<0.05），说明具有一定体外致敏性，但其致敏性较对照组BSA（终浓度为10mg/mL，与空白组差异极其显著（P<0.01））弱。关键词：林蛙皮，胶原蛋白，壳聚糖，复合海绵，致敏性IIAbstractPreparationofforestfrogcollagen/chitosancompositespongeandinvitroallergenicityevaluationThisstud

6、yispartoftheNationalScienceandTechnologySupportProgram-"SpecialResourcesProcessingTechnologyIntegrationandProducts"(2013BAD16B09).Thecollagenspongeisasponge-likesubstancewhichispreparedbymixingcollagenandothermaterialsthroughfreezeandsterilizingprocess.Itcaneffectivelypreventm

7、echanicaltraumaandwoundinfection.Collagenspongeissafeandhasbroadprospectsinthefieldofbiomaterials.Ranafrogskinisakindofwasteofoilextractionandcontentisrichofcollagen.Thus,Ranafrogskinhasthepotentialtobeusedincollagenspongepreparation.Therefore,onthebasisofcollagenobtainedfromt

8、heskinofforestfrog,weinvestigatethepreparationprocess,thesens