正文描述:《fyuA~+大肠埃希氏菌靶标抗菌肽的设计及其作用机制》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、f分类号:S852.61+1单位代码:10183y研究生学号:2013851014密级:公开uA+大肠埃希氏菌吉林大学靶标博士学位论文抗菌fyuA+大肠埃希氏菌靶标抗菌肽的设计及其作用机制肽的+DesignofAntibacterialPeptidesTargetingfyuAEscherichiaColi设anditsMechanism计及其作作者姓名:许会会用专业:预防兽医学机制研究方向:分子免疫学及病原微生物学指导教师:韩文瑜教授吉林培养单位:动物医学学院大学2018年6月2日fyuA+大肠埃希氏菌靶标抗菌肽的设计及其作用机
2、制DesignofAntibacterialPeptidesTargetingfyuA+EscherichiaColianditsMechanism作者姓名:许会会专业名称:预防兽医学指导教师:韩文瑜教授学位类别:农学博士论文答辩日期:2018年6月2日授予学位日期:年月日答辩委员会组成:姓名职称工作单位主席周锐教授华中农业大学委员范红结教授南京农业大学朱国强教授扬州大学刘思国研究员哈尔滨兽医研究所钱爱东教授吉林农业大学丁壮教授吉林大学邓旭明教授吉林大学本研究由以下项目资助国家自然科学基金(31572553,31502103)十三
3、五国家重点研发计划项目未经本论文作者的书面授权,依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人,均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用(但纯学术性使用不在此限)。否则,应承担侵权的法律责任。吉林大学博士学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交学位论文,是本人在指导教师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意
4、识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:日期:年月日《中国优秀博士学位论文全文数据库》投稿声明研究生院:本人同意《中国优秀博士学位论文全文数据库》出版章程的内容,愿意将本人的学位论文委托研究生院向中国学术期刊(光盘版)电子杂志社的《中国优秀博士学位论文全文数据库》投稿,希望《中国优秀博士学位论文全文数据库》给予出版,并同意在《中国博士学位论文评价数据库》和CNKI系列数据库中使用,同意按章程规定享受相关权益。论文级别:□硕士■博士学科专业:预防兽医学+论文题目:fyuA大肠埃希氏菌靶标抗菌肽的设计及其作用机制作者签名:指
5、导教师签名:年月日作者联系地址(邮编):作者联系电话:中文摘要+fyuA大肠埃希氏菌靶标抗菌肽的设计及其作用机制抗菌肽(antimicrobialpeptides,AMPs)是生物体经诱导产生的一类具有广谱抗菌活性和免疫调节活性的小分子多肽。如何提高抗菌肽对病原菌的靶向性,从而提高其抗菌效率,减少或避免对正常菌群的破坏作用,是目前备受关注的一个科学问题。因此,设计特异性杀灭某种病原菌的靶向抗菌肽尤为重要。近年来的研究揭示了来自鼠疫耶尔森氏菌(Yersinispestis)的一种蛋白毒素鼠疫菌素(Pesticin,Pst),结构解析
6、发现它由两个结构域组成—结合域和杀伤域,结合域可以与FyuA特异性结合,发挥靶向性作用。FyuA是一种完整的外膜蛋白,也是一些耶尔森菌、致病性大肠杆菌的主要毒力因子。特异性靶向抗菌肽(Specificallytargetedantimicrobialpeptide,STAMP)技术是一种特异性靶向抗菌肽的设计方法,通过连接一个靶向区域和一个抗菌肽杀伤区域,构建一种新的肽类抗生素,可以靶向作用于特定病原体。基于上述理论依据,将本实验室牛蛙皮肤中分离抗菌肽catesbeianin-1作为研究对象。首先,catesbeianin-1的生
7、物信息学分析表明,catesbeianin-1是一个含有25个氨基酸残基,带电数为+4,以α-螺旋为主要结构的两亲性小肽。通过柔性连接子连接catesbeianin-1与Pst的靶向结合域,设计了4个杂合肽:BD-catesbeianin-1、T-catesbeianin-1、T1-catesbeianin-1、T2-catesbeianin-1,并分析其理化性质和结构,发现它们均为以α-螺旋为主要结构的两亲性抗菌肽。利用SUMO作为分子伴侣,将4个改良肽在大肠杆菌表达系统中进行了融合表达。利用大肠杆菌表达系统成功地表达了融合蛋白
8、SUMO-BD-catesbeianin-1、SUMO-T-catesbeianin-1、SUMO-T1-catesbeianin-1、SUMO-T2-catesbeianin-1。利用SUMO蛋白酶切除融合蛋白的分子伴侣,成功得到了目的蛋白BD-
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