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时间:2019-05-10
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1、流式细胞术简介张林西生命科学研究中心0Background流式细胞术(FlowCytometry,FCM)是70年代发展起来的一种快速对单细胞定量分析和分选的新技术,能定量分析细胞的生物化学成分。其检测速度之快、统计学精度之高,是其他的方法无可比拟的。可同时从一个细胞中测得多种参数(如DNA、RNA、蛋白质、细胞体积等)进行多参数分析,为细胞生物学和生物医学的研究提供了强有力的手段。在80年代,流式细胞术已经广泛应用于基础和临床医学的研究,使之成为切实可行的有效的研究方法。FCM在医学领域中得到广泛推广应用。例如在免疫学、细胞遗
2、传学、肿瘤学、病理学、放射生物学等学科。并形成了独特的学科分支,诸如流式免疫学、流式遗传学、流式病理学、流式细胞酶学等。近年来,随着科学技术的发展,多种新的荧光探针的不断出现,使FCM技术的应用范围不断扩大,特别是各种各样的荧光探针标记的单克隆抗体和其它蛋白质的出现,为FCM研究各种组织细胞膜和细胞内抗原、肿瘤性蛋白等开辟了新途径。新的肿瘤标志物的不断出现,大大提高了FCM在医学领域的的研究水平。其发展速度之快,应用层出不穷。FCM是集现代电子物理技术、激光技术、电子计算机技术和流体力学等于一身的高科技仪器,开创了荧光技术的又一个崭
3、新的领域。近年来,此项技术发展十分迅速。具有更高灵敏度、更高分辨率、双激光、多荧光参数分析的仪器不断问世,并在朝着经济实用、操作简便、小巧精制、自动化程度高的方向发展。确信,流式细胞分析技术进一步与其它技术的结合,将极大的推动生物医学的发展。FirstcommercialFCMFCMpapers一、流式细胞仪品牌、型号简介1.BD(BecktonDickinson)公司▲1973年第一台:FACSI(FluorescenceActivatedCellSorter)▲1980年中国第一台:FACSII▲市场占有率:全球75%,中国70
4、%2.BeckmanCoulter公司:逐年增多趋势???流式细胞仪主要厂商荧光激活细胞分选仪(Fluorescenceactivatedcellsorter,FACS)名称介绍流式细胞仪的发展,从开始的设想到第一台仪器的问世,经历了几十年的时间。随着现代激光技术、电子检测技术和电子计算机技术的迅速发展,该技术在近些年来有了迅速的发展,成为目前比较完善的细胞分析工具。1.临床型(台式机)特点:光路调节系统固定,自动化程度高,操作简便,易掌握2.科研型(大型机)特点:分辨率高,选配多种波长和类型激光器,可感兴趣细胞分选到特定培养孔或板
5、上,适用于科研。新型仪器特点:仪器选2-4根激光,可检测13种荧光参数,15种参数。适用于高速分选和多色分析。自动化程度很高,提高工作效率。流式细胞仪分类:FACSAnalyzerFACSⅡFACSⅢFACS420,440FACSstarFACScanFACSstar+FACSsortFACSVantageFACSCaliburFACSVantageSEBDLSRⅠFACSVantageDiVaBDLSRⅡFACSAriaFACScanto流式细胞计的进展B-D公司流式细胞计系列EPICSXL/XL-MCL台式机CytomicsTM
6、FC500系列——最新型EPICSAltra细胞分选仪——大型科研型Coulter公司不同型号流式细胞仪FACSCaliburLSRIIFACSAriaFACSCountFACSVantage&DiVaFACSCantoBD公司不同型号流式细胞仪FACSCalibur(单激光)FACSCaliburBDFACSCaliburSystem本仪器系统(TheBDFACSCaliburTMsystem)是BD公司的另一个第一:唯一的四色、双激光台式机,可进行细胞分析及分选。特别为更大范围的应用而设计。本仪器是一个完全的同时进行多参数分析系
7、统。本仪器系统结合了唯一的双激光技术、自动化的上样功能及强大的软件,可满足临床实验室高度工作效率的需要。本系统的可调节及创新性技术还可以为研究者提供广泛的研究需要及灵活型需求。本仪器能够满足目前的临床及研究需求。它的灵活性可达到你将来的需求。本系统:容纳3色或4色荧光BDFACStationTM数据管理系统灵活性及可升级性BDLSRBDLSRIISystem本仪器系统(TheBDLSRII)可最多配置4根激光、具有检测高达18色的能力。本仪器可配置488nm,405nm,633nm,and355nmUV激光。本仪器核心是新的数字化电
8、子元件。本电子元件在16,384分散水平可数字化信号达到1千万次/秒,这样扩大了通道处理能力及增加了检测的敏感性。电子死亡时间被消除了,可进行更精确的荧光测量。这样增进了荧光测量线性、补偿及量化。BDLSRIISystem高达18色检
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