《血清学反应》PPT课件

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1、第九章血清学反应第一节概述一血清学反应的概念及一般特点抗原及相应抗体在体内或体外均能发生特异性结合，在体外结合能发生可见免疫反应。由于抗体主要存在于血清中，故称为血清学反应。血清学反应根据抗原性质、反应条件、参与反应物质，则表现出反应有多种多样。其反应的一般特点是：7/18/20212兽医微生物学及免疫学课程组（一）特异性和交叉性血清学反应具有高度特异性。由于抗原决定簇的组成、结构以及排列不同，所诱导产生的抗体也不同。抗原只能与相应抗体结合，而不能与其他抗体相结合。生物体的组成是复杂的，包含有多种抗原成分，在进化过程中形成不同的

2、种类，有各不相同的特异性抗原，在亲缘种系中往往含有部分相同的抗原成分，能引起交叉反应。7/18/20213兽医微生物学及免疫学课程组（二）结合的可逆性抗原抗体结合是分子表面结合，这一结合受理化因素的影响，当温度超过60˚C或pH降至3以下时，则抗原抗体复合物又重新离群。离群后的抗原、抗体，其理化性质、免疫活性保留。利用抗原抗体结合的可逆性，可进行免疫吸附层析，纯化抗原或抗体。7/18/20214兽医微生物学及免疫学课程组（三）最适比与带现象抗原与抗体结合，其比例适当时才可出现可见反应。当抗原抗体比例适当时，两者结合后，尚有未饱和

3、的结合点，可以继续与游离的抗体、抗原或与抗原抗体的结合物的未饱和点相联结，逐渐形成愈来愈大的复合物，出现了肉眼可见反应。比例最适合，出现反应最快，反应产物愈多。如果抗原或抗体过多，抗体和抗原结合点的聚合一开始时即达到饱和，形成小的复合物则不能继续与相邻抗原、抗体结合，不出现可见反应，谓之区带现象或带现象。为了避免血清学反应的带现象，需要将抗原或抗体作适当的稀释。7/18/20215兽医微生物学及免疫学课程组7/18/20216兽医微生物学及免疫学课程组比例不适合—不能完成第二步反应—带现象7/18/20217兽医微生物学及免疫学

4、课程组（四）反应的阶段性抗原与抗体进行结合，可分为两个阶段：第一阶段为抗原与抗体的特异性结合阶段，反应快，几秒钟至几分钟即完成，但无可见反应；第二阶段为抗原与抗体的反应可见阶段，表现为凝集、沉淀、补体结合等，反应进行较慢，需几分钟或更久。第二阶段受电解质、温度、pH值等影响。两个阶段在反应进行中无严格界限。7/18/20218兽医微生物学及免疫学课程组（五）影响反应的因素1.电解质血清学反应须在适当浓度的电解质参与下，才出现可见反应。在凝集、沉淀反应操作时，一般用生理盐水或8%—10%高渗盐水作稀释，才出现较强反应。7/18/2

5、0219兽医微生物学及免疫学课程组2.温度温度升高，可增加抗原与抗体分子运动而碰撞接触，加速反应的出现，故通常将抗原抗体混合后，放置37˚C温箱或水浴箱中，保持一定时间，促进反应。温度高，加速反应；温度低，反应时间延长，但反应结合充分，故在补体结合反应、免疫吸附实验中，采用的低温中放置过夜。3.酸碱度血清学反应通常用pH6～8，过酸或过碱都可使复合物离群，pH值在等电点时，可引起非特异凝集。7/18/202110兽医微生物学及免疫学课程组二血清学反应的类型和参与成分(见课本表9-1)三血清学反应的应用方式和目的抗原抗体反应是特异

6、性的，在应用时必须有一个是已知的，通过反应来鉴定另一个未知的。例如鉴定某一病原微生物时，多用已知抗体。诊断传染病时，对慢性病可用已知的抗原检测未知的特异性抗体；诊断急性病则用已知的抗体检测未知的抗原（病原），如炭疽病等。7/18/202111兽医微生物学及免疫学课程组（一）抗原与抗体的快速检测在诊断传染病、寄生虫病、变态反应、肿瘤、自身免疫疾病时，均已广泛应用血清学方法检查抗体或抗原（细菌、病毒）的存在，作为诊断疾病的手段。现已应用的间接血凝技术、对流电泳、标记抗体技术，均能快速、简便的确诊抗原或抗体。7/18/202112兽医

7、微生物学及免疫学课程组（二）生物活性物质的超微定量应用酶联免疫吸附实验、放射免疫等技术，抗原抗体检测的敏感度均大为提高，已达到能精确测出Pg的水平，其敏感度已大大超过了常规的化学分析。此类技术已应用于测定动物体内的激素、维生素、药物及其他病理过程中的微量产物。（三）抗原或抗体在细胞与亚细胞水平的定位用荧光抗体、酶标抗体技术，可以检测病毒或细菌在动物各种组织细胞中的分布。应用免疫酶组化法及铁蛋白标记技术进行免疫电镜观察，可以测定病毒在亚细胞水平的定位，也可测定淋巴细胞表面免疫球蛋白及抗体的产生情况。据此可分析传染病发生的机制及对免

8、疫机理的探讨。7/18/202113兽医微生物学及免疫学课程组（四）微生物的鉴定与分析应用交叉凝集实验、凝集吸收实验、沉淀实验等血清学实验，进行微生物的鉴定及区别微生物的血清型，从而确定微生物的类型及其亲缘关系。还可应用琼脂扩散实验、免疫电泳等技术，对微生物的抗