血清学反应试验ppt课件.ppt

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1、血清学试验血清学试验血清学鉴定:用已知抗体鉴定未知的细菌或标本中的抗原血清学诊断:用已知抗原检测血清中的特异性抗体抗原(antigen)是一类能刺激人或动物机体产生抗体或致敏淋巴细胞(免疫原性),并能与这些产物在体内或体外发生特异性反应的物质(反应原性)。(一)抗原的性质1.异物性异种间的物质同种异体间的物质眼睛水晶体蛋白质、精细胞及甲状腺球蛋白等自体内隔绝物质:抗原的性质抗原的性质3.立体化学结构:一般分子结构和空间构象愈复杂的物质,免疫原性愈强。4.抗原决定族antigenicdeterminant(抗原分子表面上的具有一定化学组成和结构的特殊化学基团)决定

2、其特异性2.分子量足够大:一般>104道尔顿抗原决定族人工抗原天然抗原合成抗原异种抗原同种异体抗原自身抗原核酸抗原蛋白质抗原脂抗原多糖抗原抗原种类抗原的种类半抗原(只有反应原性而无免疫原性)完全抗原微生物抗原成分-----细菌抗原成分菌体抗原:革兰氏阴性菌的菌体抗原称O抗原---脂多糖蛋白质的复合物微生物抗原鞭毛抗原称为H抗原表面抗原:不同细菌的表抗原名称不同.大肠杆菌的表面抗原称为封套抗原或K抗原,肺炎双球菌的叫荚膜抗原,伤寒沙门氏菌的表面抗原称为Vi抗原细菌抗原细菌的各种抗原微生物抗原颗粒抗原组分抗原可溶性抗原微生物抗原成分-----病毒抗原成分抗体是由抗原

3、刺激人体或动物体的B细胞,由B细胞转化成浆细胞所产生的具有特异性的免疫球蛋白(immunoglobulin,缩写为Ig).抗体(antigen)抗体种类IgG:存在于血清(占血清免疫球蛋白总量的80%)和组织液中。抗体的结构和种类IgA:二体IgD:IgE:IgM:五体IgG结构IgA结构IgA:存在于血清(占血清免疫球蛋白总量的13%)和外分泌液中IgM等结构IgM:血液中IgD:血清中,1%IgE:血清中,0.002%抗体的产生部位淋巴器官一级淋巴器官二级淋巴器官胸腺骨髓(鸟)法氏囊淋巴结(约500-600个)脾脏抗体在人体中产生部位thymusBonema

4、rrowspleenLymphnode抗体的存在部位:血清、乳汁、体液抗体作用抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)抗原抗体反应抗原抗体反应(antigen-antibodyreaction)是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。可发生于体内(invivo),也可发生于体外(invitro)。体内反应可介导吞噬、溶菌、杀菌、中和毒素等作用;体外反应则根据抗原的物理性状、抗体的类型及参与反应的介质(例如电解质、补体、固相载体等)不同,可出现凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应及中和反应等各种不同的反应类型。因抗体主要存在于血清中,在抗原或抗体的检测中多采

5、用血清作试验,所以体外抗原抗体反应亦称为血清反应(erologicreaction)。抗原抗体反应条件抗原抗体反应条件抗原抗体3.环境因素:(1)电介质:0.85%NaCI;(2)温度:37或56(3)pH值:7.0(4)振荡:适当的机械振荡(5)反应时间抗原抗体反应一般规律特异性和交叉性若两种抗原之间含有部分共同抗原时,则发生交叉反应。亲缘关系越近,交叉反应的程度也越高。反应的可逆性抗原与抗体的结合为分子表面的结合,结合的适宜温度为0~40℃、pH在4.0~9.0范围内。如温度超过60℃或pH降到3.0以下,或加入解离剂台硫氰化钾、尿素等,则抗原抗体复合物又可

6、重新解离,解离后的抗原或抗体性质不改变。抗原抗体反应一般规律最适比和带现象只有抗原与抗体呈适当比例时,才可出现可见的结合反应。当抗原过多或抗体过多,则抗原抗体的结合不能形成大的复合物,因而抑制可见反应的出现,这一现象称为带现象。抗体过多出现的抑制现象称前带现象,而抗原过多出现的抑制现象称后带现象。为了克服带现象,在进行血清学试验时,需将抗原或抗体作适当稀释。抗原抗体反应一般规律反应的二阶段性结合阶段-----反应发生快,几秒钟至几分钟。反应阶段-----较慢,需几分钟、几十分钟或更长时间。凝集反应颗粒性抗原(如细菌、红血球等)或吸附在乳胶、白陶土、离子交换树脂和

7、红细胞的抗原与其特异性抗体结合后,在有电介质存在时,凝聚成肉眼可见的凝集小块。凝集原——凝集素直接凝集反应玻片法试管法抗原抗体反应类型-----凝集反应血清凝集试验间接凝集反应将可溶性抗原(或抗体)吸附于与免疫无关的小颗粒(载体)表面,加入相应的抗体(或抗原),在适宜条件下,发生凝集反应。载体:动物的红血球;聚苯乙烯乳胶;矽酸铝;活性炭等。抗原抗体反应类型-----间接凝集反应间接血凝试验间接血凝试验吸附抗原的红细胞就称为致敏红细胞。致敏红细胞与相应抗体结合后,能出现红细胞凝集现象。 用已知抗原吸附于红细胞上检测未知抗体称为正向间接血凝试验,用已知抗体吸附于红细

8、胞上鉴定未知抗原称为反向

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