ET-1和CGRP对大鼠血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影响

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1、EI：l和c0PR对大鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影响中文摘要中文摘要第一部分内皮素．1对大鼠血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影响及机制研究研究目的：通过ET．1作用于大鼠VsMc及对董『T-1受体信号的阻断，探讨ET-l对vSMc表型转化和增殖的影响及机制。研究方法：体外培养大鼠主动脉VsMc，实验取第4～5代细胞。实验一，实验分为：Al：对照组、Bl：BT-1组、cl：ET_l+BQl23．组。用无血清DMEM培养液同步化处理2“后，各组细胞加入相应药物∞T．1，10-7mol／L；BQl23，lO‘6mo

2、l／L)，作用48h后收集细胞，用5一BrDu标记细胞增殖情况：砌二PcR检测vsMc增殖负性调控基因m沁一1和表型标志基因sM22a的表达．实验二，实验分为：A2：有血清培养72ll组；B2：无血清对照组；C2：E暑1组；D2：B1：l+BQl23组。用无血清DMEM培养液同步化处理24h后，各组细胞换用含10％Ncs的Dl肛M继续培养72ll，此时A2组终止培养收集细胞，其余各组换成无血清培养液并分别加入相应药物∞二l，lo．7mo扎：BQl23，1酽啪I彻作用48h，收集细胞，R：IWR检测HRG-1和SM22a

3、mIⅢA的表选。结果：实验一：免疫细胞化学检测，B1二l作用组可见大量增殖的VSMc，而加入ET-l受体阻断剂BQl23后标记的增殖细胞显著减少。RT-PcR检测中，ET-l组HRG一1和sM22amRNA表达较对照组有明显下调，而加入阻断剂BQl23可拮抗这一作用。实验二：R：r-】地R检测进一步证实BQl23有阻断ET-l下调vsMCHRG-l和sM22a两个基因表达的作用。结论：1．ET．1对收缩型VsMc有明显的促增殖作用，并可使VsMc表型从收缩型向合成型转化；2．ET-1对合成型VsMc同样有促表型转化和增

4、殖的作用，表明盯．1对VsMc的作用是一种不可逆的因素。3．受体信号途径是ET．1促vSMC表型转化和增殖的作用机制之一．第二部分内皮素·l与CGRP共作用对血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影哺研究目的：通过E，r-l与降钙素基因相关肽(cB啪共同作用于VsMc，研究肼l和cGPR对大鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影畸中文摘要cGRP抑制E1二l促VsMc表型转化和增殖的作用及机制。研究方法：体外培养大鼠主动脉VsMc，实验取第4～5代细胞．实验一，实验分为：al：对照组；bl：E■l组；cl：．ET-l+cGR

5、P组但T-1作用24h后，再加cGRP)；dl：CGRP+ET-1组(cGRP作用24h后，再加E1二1)。无血清DMEM培养液同步化处理24h后，各组细胞加入相应药物(ET．110．7mol几；cGRP，2×10-7moⅥ0，作用48h后收集细胞，用5-BrDu标记细胞增殖情况，盯-PcR检测HRG-l和SM22am心A的表达。实验二，试验分为：a2：血清培养72h组；b2：无血清对照组：铅ET-1组；d2：E1：l+cGRP组凹：l作用24h后，再加CGRP)；c2：CORP+ET．1组(CGRP作用24h后，再加

6、ET-1)。无血清DMBM培养液同步化处理24h后，各组细胞换用含lO％NcS的DMEM继续培养72h，此时a2组终止培养收集细胞，其余各组换成无血清培养液并分别加入相应药物(ET-110．7mol／L；CGRP，2x10。mol几)作用48h，收集细胞，R1WR检测船G-l和SM22am心A的表达。结果：实验一：免疫细胞化学检测，正限l组有大量标记的平滑肌增殖细胞，加入cGl冲后增殖细胞稍微有所减少，而先加cGRP作用组中增殖细胞数量大大减少。RT-PCR检测中，ET．1组较对照组VSMC磁沁一1和SM22a基因表达

7、显著下调：加入cGRP两基因表达有所上调，但不明显；而现加cGRP作用组中两种基因表达上调明显。实验二：翮’-PcR检测进一步证明，cGl冲可阻断ET-l下调VSMCm婚．1和SM22alIlI讯A的表达，但先加入CGRP效果更显著。结论：1．cGRP对E1：1促VsMc增殖有抑制作用，其作为预防性给药效果更明显。2．CGRP对BT促VsMC表型转化(从收缩型向合成型)有逆转作用，并同样作为预防性给药效果更显著。关键词：内皮素．1。高血压相关基因-l平滑肌22a降钙素基因相关肽表型变化作者：徐红涛指导教师：王曼晨EFl

8、和oGRP对大鼠主动脉血管平滑肌细胞表形转化和增殖的影响英文摘要AbstractPanIE觚tsand眦chanismofendotheHn-1onthIephenotype跏dpmUf．erationofv嬲cularsm∞thm畹IeoeIIsinratobjec6代：Toinv髓tigatcⅡ忙ef融地觚dmedlanism