Fc受体介导的U937细胞和中性粒细胞对免疫复合物的吞噬作用

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1、中国协和医科大学硕士学位论文中文摘要单核巨噬细胞和中性粒细胞是专职吞噬细胞，它们能藉助多种细胞表面受体来吞噬外源性抗原，其中之一便是Fc受体。单核巨噬细胞和中性粒细胞均表达F矾和FectRI，它们在Fc受体介导的识别、结合进而清除免疫复合物方面发挥着重要作用。显然，Fc受体的表达量以及不同Fc受体对不同免疫复合物吞噬和亲和特性的不同，将直接影响中性粒细胞和U937细胞对不同类型和亚类免疫复合物的清除作用，而细胞对免疫复合物的吞噬也可能造成表面Fc受体表达量的改变，从而影响细胞的功能。为了观察单核细胞前体U937细胞和人外周血中性粒细胞上各种Fe'／R和Fc0【RI的表达，

2、我们以抗Fe'社RI的单克隆抗体32．2、抗FeTRII的单克隆抗体1V．3、抗Fc'yRIII的单克隆抗体3G8、抗Fcet,RI的单克隆抗体MIPSa做为一抗，以FITC标记的山羊抗小鼠IgG做为二抗，对U937细胞和中性粒细胞进行染色，用流式细胞分析观察U937细胞和中性粒细胞表面Fc受体的表达情况。结果表明，U937细胞表面不表达Fm／RIII，仅表达少量的FeTRI和FcyRII，其FctxRI的表达量最高：中性粒细胞表面表达有大量的Fe一／R]II，其次是Fe叫kl和Fc一／RII，其不表达F咧砒。U937细胞经PMA刺激后，FctxR．I表达量上调显著，PM

3、A对Fe'tRI和FeyRII的表达没有显著增强作用，FeyRIII在细胞受PMA刺激后仍然不表达。为了了解单核巨噬细胞和中性粒细胞对各种免疫复合物的吞噬能力和特性，我们使用了一组具有相同鼠可变区和不同人恒定区的抗体，其中鼠源性可变区部分可以结合半抗原NIP，不同的人源性恒定区Fc为IgA2、IgE、IgM和IgG的四种亚型。用NIP交联的BSA与各种抗体制成带有荧光标记的免疫复合物，将U937细胞和中性粒细胞与它们分别孵育0小时、1小时、2小时、3小时和4小时，去除细胞表面粘附的荧光免疫复合物后用流式细胞分析确定U937细胞和中性粒细胞吞噬各类免疫复合物的情况。实验结果

4、显示，U937细胞和中性粒细胞能吞噬不同类型和亚类的IgG免疫复合物，它们对IgA2免疫复合物的吞噬作用最强，但几乎不吞噬IgE免疫复合物。U937细胞基本不吞噬IgM免疫复合物，而不同个体的中性粒细胞对]gM免疫复合物的吞噬情况不同：有时呈很强的吞噬作用，有时则很弱。中性粒细胞比U937细胞吞中国协和医科大学硕+学位论文噬免疫复合物的能力高四倍左右。最后，我们比较观察了U937细胞和中性粒细胞在与各种免疫复合物孵育前后细胞表面F眯和FcctRl的表达情况。分别以抗Fc"社RI的单克隆抗体32．2、抗Fe)'RII的单克隆抗体IV．3、抗Fw／RIII的单克隆抗体3G8、

5、抗FctxRI的单克隆抗体MIP8a做为一抗，以FITC标记的山羊抗小鼠IgG做为二抗，对与免疫复合物反应后的U937细胞和中性粒细胞进行染色，流式细胞分析表明，免疫复合物能调节U937细胞和中性粒细胞表面Fc受体的表达，其中以IgGl免疫复合物和IgG3免疫复合物最为明显。它们能上调U937细胞表面Fc'yRII和Fe),RIII以及中性粒细胞表面FcqrRI和Fco【RI的表达，下调中性粒细胞表面FeyR／I和Fc'CRm的表达。主题词免疫复合物中性粒细胞U937细胞Fc受体吞噬作用2中国协和医科大学硕十学位论义ABSTRACTMonocytes／macrophage

6、sandneutrophilsateprofessionalphagocytes．Theyexpressavarietyofreceptorsthathelpthecellstophagocytepathogen．OnetypeofthereceptorsistheFcreceptor．Bothmonocytes／macrophagesandneutrophilsexpressFco淑andF艰，whichplayanimportantroleinrecognizing，bindingandclearanceofimmunecomplexes(ICs)．Obviously

7、，theamountofFcreceptorsexpressedoncellsandtheaffinityofFcreceptorswillaffecttheirabilitytoclearICs．Ontheotherhand，expressionlevelofFcreceptorswillbechangedduringcellsphagocytosisofICs，whichwillsubsequentlyaffecteellfunctions．TodetectF咧RandFee．R1expressiononmonocytes