骨形态发生蛋白4在椎间盘退变中作用的实验研究

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1、第二军医大学博士学位论文骨形态发生蛋白4在椎间盘退变中作用的实验研究姓名:曹晓鹏申请学位级别:博士专业:外科学(骨外)指导教师:贾连顺20070401第二军医大学博士学位论文英文缩写AdBMP.4BpBSAcDNADEPCDMEMDMS0dmEDlAFBSGAGG口Hl函LMgMinⅦMOImRNAODPBSPCRpfu英文缩略词表英文全称AdcnovirusbonemorphogeneticproteinbasepairbovineserumalbumincomplementaryDNAdiethylpyrocarbonateDulbecc.o’SModifiedE

2、agleMediumDimethylSulfoxidedeoxynucleotidetriphosphateEthylenediaminetetraaceticacidfetalbovineserumglycosaminoglycangreenfluorescentproteinhourl【ilobaSPSEtermicrogramminutemilliliterMultiplicityofInfectionmessengerRNAopticaldensityphosphatebufferedsolutionpolymerasechainreactionplaquef

3、ormingunit中文名称腺病毒骨形态发生蛋白4碱基对牛血清白蛋白互补DNA二乙基焦磷酰胺DMEM培养基二甲基亚砜脱氧三磷酸核苷乙二胺四乙酸胎牛血清糖胺多糖绿色荧光蛋白小时千碱基升毫克分钟毫升感染复数信使RNA光密度磷酸盐缓冲溶液聚合酶链式反应噬斑形成单位第二军医大学博士学位论文英文缩写RNaseRpmRT—PCR英文全称ribonudeaserevolutionsperminutereversetranscriptPCRsecondmediantissuecultureinfectivedosetris(hydroxymethyl)aminomethane中文名称

4、核糖核酸酶每分钟转数逆转录PCR秒半数组织培养感染量三羟甲基氨基甲烷2s=独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果.与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意.本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名:、誓·:呈,告签字日期:铷印年朋∥日学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全

5、部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名.、誓哆彳导师签签字日期:仇唧年J,月∥日签字日期:7年蝴c>日骨形态发生蛋84在椎间盘退交中作用的实验研究摘要本研究用AdEasy方法构建了BMP.4基因的重组腺病毒载体;成功的进行了人退变髓核细胞的原代培养;在人退变椎间盘细胞离体实验中证实了BMP-4基因可以在退变髓核细胞或组织中持续大量表达,并刺激椎间盘基质蛋白多糖和II型胶原的产生,为基因治疗椎间盘退变开辟了新的路径;在椎间盘退变动物模型中定量分析了BMP-4基因治疗

6、对椎间盘基质合成的影响,为椎间盘退变的发病机制研究提出了新的思考。关键词:BMP-4;椎间盘退变;重组腺病毒:髓核;蛋白多糖;定量分析:动物模型;基因治疗ExperimentalstudyontheeffectofBMP-4inIntervertebraldiscdegenerationAbstractIntheseresearch,therecombinantadenovirusvectorcontainingBMP4geneWaSprepared;theprimarycultureofhumandegenerativeNPcellsinmonolaycrwassu

7、ccessfulbyanenzymeassimilationmethod;theresultsdemonstratedinnovativelythattheBMP.4genecallbeexpressedinhumandegenerativeNPcellscontinuouslyandabundantly,andincreaSetheproductionofintervertebraldiscmatrix(proteoglycansandtypeIIcollagen).Itwouldbreakanewpathforthegenetherapyofin

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