石楠组织培养和多倍体诱导的研究

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时间:2019-05-15

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1、缩写符号nUnhdSgmglrnl.BANAAIBATDZAcPVPVc符号说明英文名称nliInltehourdaysecond咖milligmmlittcrrⅡjllilit盱6·Ben巧】aIIlinopurineNapb曲alene—aceticacidhdole.3.blltvricacidThidiazu九)nactivecarbonP01yvinylpy仃0lidoneVita】[IlinC中文名称分钟小时天秒克毫克升毫升6.苄基腺嘌呤萦乙酸吲哚丁酸噻苯隆活性炭聚乙烯基吡咯烷酮维生素CY903971关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交

2、的学位论文,是在导师指导下,独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体,均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解LII东农业大学有关保留和使用学位论文的规定,同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名:导师签名:弛蟊刻址日期:g:阳山东农业大学硕士学位论文摘要石楠是一种优良的园林

3、绿化树种。石楠组织培养研究的主要目的是探索石楠组织培养的快速繁殖体系和再生体系,旨在为抗冻基因转化石楠的抗性育种工作提供材料及技术支持。石楠的组织培养以石楠的新梢茎段、种胚和叶片为材料,主要探讨组织培养过程中各种最佳培养基、组织培养条件及组织培养过程中存在问题如外植体污染、褐化等问题的解决方法。石楠多倍体诱导研究以播种的石楠幼苗为材料,采用滴液的方法用秋水仙素水溶液处理石楠幼苗的生长点,对不同的处理方式、处理浓度和处理时间的多倍体诱导效果进行了较为系统的研究。主要研究结果有:1.石楠茎段的最佳表面消毒方法:75%乙醇消毒30s+O.1%升汞7Ⅲin;石楠初

4、代培养的最佳培养基为Ms+BA2.O皿g/1+N从O.1mg/1,蔗糖309/l,琼脂7.59/l。最佳增殖培养基是:MS+BAl.0mg/1+NAA0.1mg/l,在此种培养基上增殖芽生长快,叶绿,茎较粗,有较多次生芽发生,并且无玻璃化现象出现。在所试验的培养基中BA浓度超过2.omg/1时,增殖苗中出现了玻璃化现象。2.对茎段外植体来说,PvP、vc、AC三种抗褐化剂中以P”的抑制褐化的效果最好;以第2—3芽半木质化的茎段为外植体要好于其它的茎段部位:5—8天的4℃低温处理能够很好的抑制茎段的褐化:降低大量元素用量也能有效的抑制石楠茎段的褐化:不同的取

5、材季节对石楠的褐化有着显著的影响,石楠茎段外植体以4—5月份及9月份褐化最轻。3。石楠种胚消毒的最佳方案是:75%乙醇30s+O。1%升汞12min:种子胚萌发的最佳培养基为MS培养基:去根实生苗增殖的最佳培养基为MS+BAl.Omg/l+NAA0.1Ⅲg/l。增殖苗最好的生根培养基是1/2~量S+IBA0.2mg/l。4.试验中在所有添加TDz和N从的MS培养基上都出现了大量的愈伤组织。叶片再生芽的最佳培养基为:MS+TDz0.5mg/1+N从O.2mg/1。5.采用芽苗滴液的方法诱导石楠多倍体植株是可行的。试验共得到多倍体植株40棵。利用浓度为O。5%

6、的秋水仙素水溶液处理120小肘后,多倍体诱导的成功率可以达到37.5%;随着秋水仙素水溶液浓度的降低和处石楠的组织培养和多倍体诱导的研究理时间的缩短,诱导的成功率呈现下降的趋势;浓度为0.01%的秋水仙素水溶液处理的石楠幼苗在不同的处理时间、处理方式中均未发现多倍体植株。关键词:石楠组织培养再生多倍体2山东农业大学硕士学位论文AbstractP^D矗甩缸se玎“缸胁工f枷isanexcellentkilldof1andscape仃ee.。Ihem勾orobjectoftissuecultllrestudyistoexploitmete蛳quesystems

7、ofr印idpropagationaIldregene删on,inord酬ngtoo妊hmaterialandtechniquesupportsf.orrcsistancebreedingof肋omz蛔by把msf0珊ing晰1王lCold-resis协mGene.Usingme丘eshshoots,seedandleavesas廿lema例als,theol'廿删mediumandculturcconditionaresmdied,脚ing也emetllodstosol、屯也eⅡla_tterofexplantsp01枷onaⅡdbrownir培.And

8、iIlthissnJdy,themelhodStoi11ducep

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