红枣中环磷酸腺苷的分离纯化及其口服液的开发

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1、分类号：密级：学校代码：10069研究生学号：Y20119020红枣中环磷酸腺苷的分离纯化及其口服液的开发SeparationandPurificationofcAMPfromRedJujubeandResearchofitsOralLiquid研究生姓名：段禹轩专业名称：食品工程指导教师姓名：李建颖教授李有起高级工程师张斌高级工程师论文提交日期：2013年5月学位授予单位：天津商业大学I删嬲独创性声明及使用授权声明一、学位论文独创性声明本人所撰写的学位论文是在指导教师的指导下独立完成的研究成果。除己明确标注或得到许可外，所撰写的

2、学位论文中不包含他人已申请学位或其他用途所使用过的成果，不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，本人的指导教师对此进行了审定。对本文的研究做出重要贡献的个人或集体，本人己在文中做出明确的说明并表示谢意。如有不实，本人承担相应责任。二、学位论文及研究成果使用授权声明本人同意授权天津商业大学以非赢利方式保存、使用本人的学位论文的电子版及纸质版。授权天津商业大学将本论文的全部内容或部分内容提供给有关方面编入数据库进行检索、出版及提供信息服务。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。本人在校期间取得的研究数据、相关成果

3、等知识产权归天津商业大学所有。注：涉及保密的学位论文在解密后适用本授权。学位论文作者签字：指导教师签字：日期：孩禹-辑表陇j山房年．C-月30日摘要天然产物中的功能性成分既可以作为保健食品的关键原料又可以入药治疗各种疾病，所以对天然产物中功能性成分的研究、分离、纯化越来越重要。红枣中含有含量很高的环磷酸腺苷(cAMP)，其含量在180多种天然植物中是最高的。cAMP是细胞内参与调节生物学功能和物质代谢的重要物质，是生命信息传递的“第二信使”，它有着抗癌、抗氧化、帮助人体内物质代谢、提高人体免疫等功效。所以对红枣中cAMP的分离纯化

4、的研究，以及利用分离纯化出的cAMP做成附加值较高的保健食品，都有着较高的经济价值和社会效益。本文选择红枣为分离纯化cAMP的实验原料。由于红枣提取液中含有胶原蛋白、纤维素等物质，而这些物质的存在影响了cAMP的抽提、分离和纯化，故可以利用复合果浆酶对红枣提取液进行水解以消除这方面的影响。本实验主要通过水浴加热浸提法以及离子交换法对红枣中的cAMP进行分离，经过浓缩和真空冷冻干燥得到cAMP的冻于粉粗品。然后采用硅胶柱层析方法对其进行纯化，经过浓缩和真空冷冻干燥后即可得到cAMP的冻干粉纯品。采用高效液相色谱法作为cAMP的主要检

5、测方法。本实验主要包括以下三部分内容：f1)红枣中cAMP浸提工艺的优化将红枣原料经过清洗破碎后，加入适量的纯水混匀，在不同实验条件(浸提时间，浸提温度，料液比)下进行热水浸提。提取液经0．459m膜过滤后，用高效液相色谱法检测cAMP的含量。通过对热提取工艺的单因素和正交实验的结果分析可以得知，cAMP分离的最佳工艺条件为：料液比1：4，浸提温度80V，浸提时间5h。然后用甲酸改型后的阴离子交换树脂进行分离，经旋转蒸发器进行浓缩、真空冷冻干燥处理后即可得到cAMP粗品。(：2)红枣中cAMP纯化工艺的优化准确称取经提取工艺分离的

6、c脚粗品，按不同的上样液影响条件(浓度、流速、pH值、)进行纯化处理。收集流出液经o．459in滤膜后，用高效液相色谱法检测cAMP的含量。通过对纯化工艺的单因素和正交实验的结果分析可以得知，cAMP纯化的最佳工艺条件为：上样流速2mL／min、pH值4．5、浓度O．5mg／mL。然后用乙酸乙酯：苯：甲醇(1：1：3)作为洗脱剂，对已经吸附的硅胶柱进行洗脱，经浓缩、真空冷冻干燥后即可得到cAMP纯品。经高效液相色谱法检测后证明，分离纯化后的cAMP纯品含量可达到95％左右。(3)cAMP口服液的研制以从红枣中分离纯化出的cAMP为

7、主要材料研制cAMP口服液，通过稳定性实验测定cAMP口服液的稳定期。由实验结果可知，此cAMP口服液应在35℃以下避光保存，贮藏性状稳定。关键词：红枣；cAMP；提取；纯化；口服液AbstractThefunctionalingredientsofnaturalproductscanbeusedaskeyrawmaterialsofhealthfood，andasamedicineofvariousdiseases，SOtheresearch，separationandpurificationoffunctionalingred

8、ientsinnaturalproductarebecomingmoreandmoreimportant．Researchersfoundthattheredjujubecontainsahighnumberofringadenosinephosp