秦皮素对大肠杆菌的抑菌作用机制

秦皮素对大肠杆菌的抑菌作用机制

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1、分类号:密级:学校代码:10165学号:201011196遣掌师籍大学硕士学位论文秦皮素对大肠杆菌的抑茵作用机制作者姓名:学科、专业:研究方向:导师姓名:周磊微生物微生物化学谢明杰教授2013年O6月学位论文独创性声明IUlIIIIIIIIillllUllllIIIY2376284本人承诺:所呈交的学位论文是本人在导师指导下所取得的研究成果。论文中除特别加以标注和致谢的地方外,不包含他人和其他机构已经撰写或发表过的研究成果,其他同志的研究成果对本人的启示和所提供的帮助,均已在论文中做了明确的声明并表

2、示谢意。学位论文作者签名:学位论文版权的使用授权书本学位论文作者完全了解辽宁师范大学有关保留、使用学位论文的规定,及学校有权保留并向国家有关部门或机构送交复印件或磁盘,允许论文被查阅和借阅。本文授权辽宁师范大学,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库并进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文,并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后使用本授权书。学位论文作者签名:图磊指导教师签名:签名日期:年月日辽宁师范大学硕士学位论文摘要秦皮是具有代表性的天

3、然香豆素类化合物,秦皮素是秦皮一种有效成分,有研究表明秦皮素有抑菌作用,但其抑菌机制目前尚不十分清楚,本文以大肠杆菌为供试菌株,对秦皮素的抑菌活性及其机制进行了研究,实验结果显示:1.秦皮素对大肠杆菌有较强的抑制活性和杀菌效果。秦皮素对大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.04mg/mL;当0.05mg/mL的秦皮素作用大肠杆菌72h后,其杀菌率为68.2%。2.电导率实验、大分子含量实验、扫描电镜和透射电镜实验结果显示,秦皮素作用大肠杆菌一定时间后,可影响其细胞膜的通透性,但对其作用效果不明显,表明秦皮素对

4、大肠杆菌的作用靶点不在细胞膜。3.秦皮素作用大肠杆菌后,与对照组相比,大肠杆菌体内的可溶性蛋白的总量有比较明显的变化,当秦皮素作用大肠杆菌20h后,其可溶性蛋白含量比对照组减少了59%。4.琼脂糖凝胶电泳实验结果显示秦皮素对拓扑异构酶I和II的活性均有抑制作用,但其抑制作用不显著,说明秦皮素对大肠杆菌的作用靶点不在拓扑异构酶上。5.质粒消除实验结果显示秦皮素对大肠杆菌有质粒DNA消除作用,且随着作用时间的延长质粒消除的效果增强。秦皮素对大肠杆菌有较明显的抑制作用,其主要药效是减少大肠杆菌菌体内可溶性

5、蛋白的含量,说明秦皮素的抑制作用机制是可以抑制蛋白质合成,及其相关生理功能,从而达到抑制大肠杆菌正常生长和诱导菌体死亡的作用。关键词:秦皮素;大肠杆菌;抑菌活性;抑菌机制秦皮素对大肠杆菌抑菌作用机制AntibacterialActivityandMechanismofFraxetinonEscherichiacoliAbstractCortexFraxiniisatypicalnaturalcoumarincompoundwitheffectivecomponentoffraxetn.Researc

6、hesshowthatithasbacteriostaticaction,buttheantibacterialmechanismoffraxetnisunknown.WestudythebacteriostaticactionandantibacterialmechanismoffraxetnbasedinE.colistrains.Theresultsshowasfollowing:1.Fraxetinhasstronginhibitoryactivityandsterilizationeffe

7、ctinE.coli.111eminimuminhibitionconcentrationoffraxetiniS0.04mg/mL.MlenconcentrationoffraxetiniSupto0.05mg/mL,thesterilizingratereacheshighest68.2%after72h.2.nleresultsofconductivityexperiment,contentofmacromoleculesexeriment,scanningel—ectronmicoscopy

8、experimentandtransmissionelectronmicoscopyexperimentshowthatfraxetincallcausedamageeffectonthemembraneofE.coli,buttheeffectisnotobvious.ItindicatesthatthemaintargetoffraxetinisnotincellmembraneofEcoli.3.Comparedwiththecontrolgroup,theam

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