基于细胞膜片技术构建组织工程管状骨

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1、基于细胞膜片技术构建组织工程管状骨中文摘要骨组织的再造和骨缺损的修复一直是临床治疗中的难题之一，组织工程技术为解决这一难题提供了新的思路和方法。骨组织工程是目前组织工程中研究的重点内容，研究对象包括种子细胞、支架材料及与骨生长有关的生长因子三方面内容。目的：本实验以临床应用为出发点，研究如何在体外构建具备一定形态、体积和机械强度的组织工程骨移植体，目的在于：①探索具有更高的细胞利用效率和获取更多种子细胞数目的培养方法；②在细胞膜片技术的基础上，研究如何在体外构建具备三维立体结构的管状骨移植体：③研究如何利用生物反应器在

2、体外重建出具有骨特性的组织工程管状骨；④观察将体外构建的骨移植体植入裸鼠体内后继续分化成熟的能力和分化稳定性的保持。方法和结果：实验中，首先采用原代细胞连续培养方法将兔骨髓基质细胞培养成具有一定机械强度和可操作性的细胞膜片，并对其结构进行了检测。在此基础上，利用细胞膜片和玻璃管外支撑体在体外通过生物反应器构建出管状骨移植体，得到的标本虽然具有一定的机械强度，但是和天然骨组织还有一定的差距。进一步我们将体外构建的管状骨移植体植入裸鼠皮下，通过1．2个月的体内实验，得到了外部形态和内部结构都与天然骨组织相似的组织工程人工骨

3、。与此同时我们还探究了在细胞膜片的构建时添加珊瑚颗粒，然后用相同的策略构建管状骨移植体，最终发现珊瑚颗粒的存在与否对组织工程骨的构建和成熟具有很大影响。结论：研究结果表明，连续培养的复合珊瑚颗粒的细胞膜片+外支撑的构建策略在生物反应器条件下能够诱导形成具备特定形态的仿生组织工程骨，而且移植体在体内会继续发育成熟而接近天然骨组织。该策略为体外构建管状骨移植体提供了一个简单实用的方法。我们相信通过不断的探索和研究，该方法将很有可能最终应用于临床治疗工作当中。关键词：骨，组织工程，骨髓基质细胞，细胞膜片Theconstruc

4、tionoftissueenglneerlngtuDl工0rrnD0ne'一'-，graftwithcellsheettechniqueAbstractTissuereconstructionandreparationremainsoneofthemostchallengingtasksintheclinicalsurgery．Tissueengineeringprovidesanovelapproachtosolvethisproblem．Bonetissueengineeringisoneofthefocalpoi

5、ntsintissueengineering，whichinvolvesseedcells，scaffoldsandgrowthfactors．Objective：Toregeneratetissueengineeredbonegraftwithfavorablecontour，adequatevolumeandenoughstrengthforclinicalapplication．Indetails：1．Toexplorehowtogetmoreseedceilsincellcultureandhigheffici

6、encyincellusageintissuefabrication．2．Toregeneratethree·dimensionalbonegraftinvitrowithcellsheetandwithoutthetraditionallyusedscaffolds．3．Toestablishstrtegyofregeneratingtissueengineeredbonebybioreactorinvitro．4．Toobservethedifferentiationabilityandstabilityofthe

7、tissueengineeredbonegraftinvivo．Methodsandresults：Rabbitbonemarrowstromalcells(BMSCs)wereculturedcontinuouslytoformacellsheetwithpropermechanicalstrengthandconvenienthandlingproperty．Thecharacteristicsofthecellsheetwerestudied．Tubiformbone铲世wasfabricatedbyrollin

8、gthecellsheetsaroundaglasstubeandculturedinbioreactorinvitro．Theresultsshowedthatthesamplehadcertainmechanicalstrength．Furthermore，weimplantedthetubiformbonegraftsubc