高效液相色谱法测定生物胺衍生条件的优化研究

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1、第8卷第1期南方水产科学Vo1．8．No．12012年2月SouthChinaFisheriesScienceFeb．．2012doi：10．3969／j．issn．2095—0780．2012．01．008高效液相色谱法测定生物胺衍生条件的优化研究杨贤庆，翟红蕾，郝淑贤，岑剑伟，魏涯，石红，黄卉，周娟娟(1．中国水产科学研究院南海水产研究所，农业部水产品加工重点实验室，国家水产品加工技术研发中心，广东广州510300；2．上海海洋大学，上海201306)摘要：利用荧光检测器(FLD)，采用柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)对组胺(HIS)、色胺(TRP)、2-苯乙胺(2一PHE)、腐胺

2、(PUT)、尸胺(CAD)、酪胺(TYR)、亚精胺(SPD)和精胺(SPM)8种生物胺(BA)进行测定分析。通过探究丹酰氯(Dns—C1)质量浓度、反应体系的pH、衍生时间及衍生温度对生物胺衍生反应的影响，确定最优的衍生条件。结果显示，当Dns—C1的质量浓度为BA质量浓度的10倍、pH11．0、40℃下避光反应45min，所有BA均能有效分离。BA的相对标准偏差(RSD)在3％以内，能够满足分析要求。关键词：生物胺；丹酰氯；柱前衍生；高效液相色谱法中国分类号：TS254．7文献标志码：A文章编号：2095—0780一(2012)01—0049—05Optimizationfordete

3、rminingderivativeconditionsofbiogenicaminesbyHPLCYANGXianqing，ZHAIHonglei，HAOShuxian，CENJianwei，WEIYa，SHIHong，HUANGHui，ZHOUJuanjuan，(1．SouthChinaSeaFisheriesResearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences；KeyLab．ofAquaticProductProcessing，Min~tryofAgriculture：NationalR&DCenterforAquatwProductPr

4、ocessing，Guangzhou510641，China；2．ShanghaiOceanUniversity，Shanghai201306，China)Abstract：Usinghighperformanceliquidchromatographywithfluorescencedetectorandpre—columnderivatization，wedetermined8biogenicamines(histamine，trptamine，2-phenylethylamine，putrescine，cadaverine，tyramine，spermidineandspermin

5、e)．Theopti-malderivativeconditionsaredeterminedbyinvestigatingtheeffectsofdansylchlorideconcentration，pH，reactiontimeandreactiontemperatureonthederivatizationofbiogenicamines．Theresultshowsthatallaminesayewellresolvedwithdansylchloridewhosecon·centrationis10timesofthatofbiogenicaminesatpH11．0and4

6、0℃indarknessfor45min．Thegoodrepeatabilityofallbiogenica—mineswithrelativestandarddeviation≤3％isconsideredacceptable．Keywords：biogenicamines；dansylchloride；pre—columnderivatization；HPLC生物胺(BA)是一类具有生物活性的低分子量脱羧作用形成或由醛、酮类物质在氨基酸转氨酶作碱性化合物，主要是由相应的氨基酸通过微生物的用下产生。BA具有重要的生理功能，如促进机收稿日期：2011-07-08；修回日期：2011-0

7、8-02资助项目：农业产业技术体系项目(CARS-49)；国家农业科技成果转化资金项目(2010GB23260577，2009GB2E200303，2010GB2E000335)；广东省科技计划项目(2011A020102005，2009A020700004，2008A020100006，2009B020201003)；中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国水产科学研究院南海水产研究所)资助项目(2010YD07)；广西科