草甘膦致小鼠机体氧化损伤作用的研究

草甘膦致小鼠机体氧化损伤作用的研究

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1、毒理学杂志2011年10月第25卷第5期JToxicolOctober2011Vo1.25No.5中图分类号:R994.6文献标识码:A文章编号:1002—3127(2011)05—0364—03·实验研究·草甘膦致小鼠机体氧化损伤作用的研究赵伟,曹曦予,吴艳萍,张丹丹,张呖(哈尔滨医科大学公共卫生学院,黑龙江哈尔滨150081)【摘要】目的通过体内试验,研究草甘膦(glyphosate)对小鼠机体的氧化损伤作用。方法将昆明种清洁级小鼠按体重随机分为低剂量组(312.5irlg/kg)、中剂量组(

2、625nlg/kg)、高剂量组(1250ITIg/kg)和阴性对照组(3%淀粉溶液),经口灌胃连续染毒30d。染毒结束后,采用分光光度法测定小鼠肝、脾、肾中的丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(TAC)及血清中的MDA、TAC、晚期氧化蛋白产物(AOPP)的含量。结果各剂量组肝脏、脾脏和肾脏的脏体比与对照组相比,均无显著性差异(P>0.05);TAC含量随剂量增加呈降低趋势,其中肝脏和肾脏组织的高剂量组TAC含量明显低于对照组(P<0.05),其他各剂量组均无显著性差异(P>0.05);MDA含量随剂

3、量增加有增高趋势,但只有肝脏组织中的高剂量组及脾脏组织中的中剂量组MDA含量明显高于对照组(P<0.05);随着染毒剂量的增加,血清中AOPP含量不断增高,中、高剂量组AOPP含量明显高于对照组(P<0.05),呈一定的剂量一反应关系。结论草甘膦能降低小鼠的总抗氧化能力,损伤蛋白质和脂质,造成机体的氧化损伤,导致各种疾病的发生。【关键词】草甘膦;丙二醛;总抗氧化能力;晚期氧化蛋白产物草甘膦是目前世界上使用最广泛的一种除草剂,氧化应激代谢产物、总抗氧化能力等方面来研究草甘具有杀草谱广、效率高、低残留

4、、对人畜低毒等特点。膦对机体的氧化损伤作用,为评价草甘膦的毒性和制草甘膦对皮肤有轻度刺激作用,急性中毒时可出现恶定切实可行的预防措施提供科学依据。心、呕吐、头昏、腹痛、呼吸困难、共济失调等症状,甚至死于低血压或肺水肿¨。人类处在生态金字塔顶端,1材料与方法由于富集作用,农药对人类的危害被放大,从而影响人1.1试剂与仪器95%草甘膦原粉购自杭州邦化化类生存安全。目前,关于草甘膦的危害已有一些报道,工有限公司;0.01mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)、研究表明草甘膦能引起黄鳝红细胞核异常率上升,并氯胺

5、一T、1.16mmol/L碘化钾、冰醋酸等均为国产分析诱发黄鳝染色体数目和结构畸变率上升;通过骨髓纯;考马斯亮兰蛋白测定试剂盒、总抗氧化能力(TAC)微核试验及精子畸形试验,康菊芳等证实草甘膦对测定试剂盒和丙二醛(MDA)测定试剂盒购自南京建小鼠具有生殖毒性,并具有一定致突变作用;对中华大成生物工程研究所。电热恒温水浴箱(上海医疗器械蟾蜍具有慢性毒性作用,并有可能因此破坏农林生态七厂),电子天平(13本Shimadzu公司),7520紫外可系统。El—GendyKS等研究还发现革甘膦对尼罗见分光光

6、度计(上海第三分析仪器厂),离心机(上海吴郭鱼细胞免疫和体液免疫都有不同程度的抑制,并安亭科学仪器厂)。呈现一定的浓度依赖性。1.2方法氧化应激是过量的自由基(包括活性氧)突破抗1.2.1动物分组与处置:健康清洁级昆明种小鼠40氧化防御系统引起的脂类、蛋白质、多糖、DNA等生物只,由黑龙江省肿瘤研究所动物室提供,合格证号:大分子过氧化反应过程。自由基对生物大分子的氧化SCXK(黑)2006-008,体重20~25g,雌雄各半。动物损伤被认为是启动和促进肿瘤发生的最重要因素,这房合格证书号:SYXK

7、(黑)2006-010。动物室温度些过程是遗传不稳定性、癌变、突变过程中的重要事25℃,相对湿度50%,光照12h明、12h暗。小鼠按件。随着草甘膦使用量日益增加,其对生态环境和人体重随机分为4组(雌雄各半):3%淀粉溶液对照组,草体健康的潜在危害将不断加大,本研究拟通过体内试甘膦312.5ms/kg(1/32LD5o)、625ms/kg(1/16LD50)、验,检测染毒后小鼠体内氧化损伤相关的各项指标,从1250mg/kg(1/8LD∞)组(草甘膦原粉用3%淀粉溶液溶解),经口灌胃连续染毒30d

8、,自由摄食饮水。染毒基金项目:国家自然基金课题(81072333)作者简介:赵伟,硕士研究生,研究方向:除草剂对机体的危害。结束后,眼球取血后处死,解剖取肝脏、脾脏和肾脏,称通讯作者:张晒,教授,研究方向:农药对机体危害。重,液氮速冻,备用。毒理学杂志2011年lO月第25卷第5期JToxicolOctober2011Vo1.25No.51.2.2组织匀浆制备:取肝脏、脾脏和肾脏分别加生物。如表3所示,随剂量增加血清和各脏器中MDA含理盐水研磨,制成1:10的匀浆液,3000g离心

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