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1、第26卷第3期佛山科学技术学院学报(自然科学版)Vol.26No.32008年5月JournalofFoshanUniversity(NaturalScienceEdition)May2008文章编号:100820171(2008)0320052203不同氮源对北冬虫夏草生长影响的研究杨宣华(佛山市华材职业技术学校,广东佛山528251)摘要:以硝酸钾、蛋白胨、黄豆粉、硫酸铵、尿素5种不同氮源对北冬虫夏草的菌球数量、干重,菌丝生长状况及子实体的鲜重和干重进行研究,结果表明:液体培养的菌球最多的是蛋白胨,其次是黄豆粉,最差是硝酸钾;固体斜面培养基从菌丝长势来看最好是蛋白胨,最差的是
2、硝酸钾。北冬虫夏草最佳的氮源是黄豆粉。关键词:北冬虫夏草;氮源;生长中图分类号:S567.3文献标识码:A[1]北冬虫夏草(CordycepsmilitarisLink)又名蛹虫草,是一种具有广阔开发前景的珍稀药用保健食品,也是我国名贵中药之一,其所含药用成分虫草酸、虫草素、虫草多糖和SOD可与冬虫夏草相媲美,特[2]别是其所含的活性成分虫草酸和虫草素明显高于冬虫夏草。据报道,北冬虫夏草具有重要的滋补价[3]值,对慢性支气管炎、肝炎、高血压、心脏病、肾炎、癌症以及消除疲劳、紧张等有显著治疗和预防作用。近十年来,对北冬虫夏草的研究有很大进步。我们采用液体深层培养和固体培养的方法对北
3、冬虫夏草生物特性方面做了一系列研究。1材料与方法1.1供试菌种北冬虫夏草母种由山东省济宁光大食用菌研究中心提供,华材职业技术学校进行提纯复状与保存。1.2菌种活化采用PDA培养基,接入保存菌种,置于22℃恒温生化培养箱培养,8～10d菌丝满后备用。1.3试验配方(1)液体培养基配方。马玲薯200g,葡萄糖200g,KH2PO43g,MgSO41g,VitB120片,微量元素少许,马玲薯汁液1000mL,pH值自然。(2)固体斜面培养基配方。在(1)的基础上,增加琼脂20g。(3)生产培养基配方。大米95%,葡萄糖1%,KH2PO40.3%,MgSO40.1%,VitB12%,微量
4、元素少许,料水比为1∶1.6,pH值自然。1.4试验方法(1)以1000mL水加15g的蛋白胨比例进行计算氮含量为标准,在(1)配方中分别加入等量的硝酸钾、蛋白胨、黄豆粉、硫酸铵、尿素,依次标记为A,B,C,D,E5个处理,每个处理10瓶,重复10次,以没有加氮源的为对照(CK)。分别装于250mL的三角瓶中,每瓶装120mL,在0.14Mpa压力下126℃灭菌30min,冷却后,无菌操作接入10%的备用菌种,22～23℃下,转速120rpm振荡培养10d,测定菌球数量与菌丝干重并记录。菌球测定方法是在终止发酵后,分别取10个培养瓶测定菌球数量,重复10收稿日期:20082032
5、21作者简介:杨宣华(19752),男,广东佛山人,华材职业技术学校教师。第3期杨宣华:不同氮源对北冬虫夏草生长影响的研究53次;菌丝体干重测定是用冷冻离心机8000rpm,离心10min,获得北冬虫夏草菌丝体,60℃下烘干恒重,计算100mL培养液里中菌丝干重(mgö100mL)。(2)以20g的蛋白胨中氮为标准,在(2)配方中分别加入等量的硝酸钾、蛋白胨、黄豆粉、硫酸铵、尿素,依次标记为A,B,C,D,E5个处理,每个处理14支,重复10次,以没有加氮源的为对照(CK)。分装试管,每支装试管1ö3,塞好棉花塞,7支为1扎包好,在0.14Mpa压力下126℃灭菌30min,冷却
6、后,无菌操2作接入1cm的备用菌种,22～23℃下,观察菌丝的生长速度和菌丝特征,并记录。(3)以20g的蛋白胨中氮为标准,在(3)配方中分别加入等量的硝酸钾、蛋白胨、黄豆粉、硫酸铵、尿素,依次标记为A,B,C,D,E5个处理,每个处理20瓶,重复10次,以没有加氮源的为对照(CK)。分别装于500mL的罐头瓶中,在0.14Mpa压力下126℃灭菌60min,冷却后,无菌操作接入20mL的备用液体菌种,22～23℃下,观察菌丝生长状况、封底情况和子实体的鲜重和干重,并记录。2结果与分析2.1不同氮源对北冬虫夏草菌球数量的影响从表1可以看出,北冬虫夏草对氮源的利用是比较广泛的,氮源
7、能够促进菌丝的生长和菌球的形成。在试验中,各氮源与对照之间存在明显差异,以蛋白胨对菌球形成最好。表1不同氮源对北冬虫夏草菌球数量的影响表2不同氮源对北冬虫夏草菌球干重的影响平均菌球总数量菌球鲜重ö菌球含水量ö菌丝体干重ö处理ö(个·100mL-1)差异显著性处理(mg·100mL-1)%(mg·100mL-1)A336dA2512.793.7158.3dB1004aB9198.692.8662.3bC989abC7876.191.2693.1aD613cD5251.392.439
