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时间:2019-05-10
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1、植物组织中丙二醛含量的测定小组成员:江容宇陈玲许丽娟王龙凤一原理植物器官在逆境条件下或衰老时,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是其中产物之一,通常将其作为脂质过氧化指标,用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。二材料、仪器设备及试剂(一)材料植物叶片(经逆境条件处理)(二)仪器设备研钵,试管,移液管,恒温水浴锅,离心机,分光光度计(三)试剂10%三氯乙酸(TCA)0.6%硫代巴比妥酸(TBA)材料正常生长的以及经逆境处理的西红柿植物的叶片。试剂5%三氯醋酸溶解定容0.67%(W/V)硫代巴比妥酸(TBA
2、)10%的TCA配制仪器设备研体剪刀分光光度计;分光光度计恒温水浴;试管:20mL×4离心机。方法与步骤新鲜叶片,去污,剪碎,混匀称三份,0.5g左右分别置于三只研体中,加5%TCA研磨所得匀浆在3000r/min下离心10min取上层清液2ml,加0,67%TBA2ml,混匀在100度的水浴上煮沸30min,冷却后再离心一次分别测定上层清液在450nm,532nm和600nm处的吸光值,并按公式算出MDA浓度(3)计算按公式计算MDA的含量(μmol/g):MDA的浓度(μmol/L)=6.45(A532-A600)-0.56A4
3、50A450代表450nm波长下的吸光值A532代表532nm波长下的吸光值A600代表600nm波长下的吸光值四注意事项取上清液时要小心,不要将沉淀取出使用离心机时,一定要注意平衡.返回思考题不同植物在同一逆境下,丙二醛含量变化不同,说明了什么??植物器官衰老或在逆境下遭受伤害,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终产物,其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。MDA从膜上产生的位置释放出来后,可以与蛋白质、核酸反应,从而丧失功能,还可使纤维素分子间的桥键松弛,或抑制蛋白质的合成。不同植物体内,各个反应进行的程度
4、不同,因而最终的丙二醛含量会有所不同;这与植物的耐受程度也是有关系的。我会丙二醛在植物中含量是不是越少越好?丙二醛含量高,说明植物细胞膜质过氧化程度高,细胞膜受到的伤害严重,同时也会告诉机体需要进行更激烈的胁迫应答反应,保护机体!自然状态下,物极必反!想一想谢谢!
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