远端缺血预处理对缺血性脑卒中MRDWI的影响及其机制探讨

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1、分类号：R-81密级：学位类别：专业学位博士学位论文DOCToRALDISSERTATIoN学校代码：学号：学科门类：l0O622010601060医学论文题目：远端缺血预处理对缺血性脑卒中MRDWI的影响及其机制探讨TITLEResearchontheinfluenceoflimbremoteischemicmditioningonstroke。MRDWIanditspreconditioninginIVIICDW1anItSpotentialmechanism一级学科：临床医学二级学科：影像医学与核医学论文作者：魏鼎泰指导教师：张云亭教授导师

2、组：孙志华张权副教授天津医科大学研究生院二O一三年五月学位论文原创性声明一UI丫IIIIIUl2II

3、IlU≯lUll9Ililll鱼llilll_illllUj!!llUll2UUlll㈣㈣㈣㈣㈣I本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：7户年夕月弓p日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医

4、科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密口，在——年解密后适用本授权书。本论文属于不保密囱。(请在相对应的方框内打“√”)学位论文作者签名：导师签名：日期：声彬年朋岁口日日期：p传年妨≥咽天津医科大学博士学位论文远端缺血预处理对缺血性脑卒中MRDWI的影响及其机制探讨天津医科大学总医院研究生：魏鼎泰导师：张云亭教授中文摘要目的：探讨经肢体远端缺血预处理(1imbremote

5、ischemicpreconditioning，LRP)后大鼠脑缺血模型在DWI图像上的信号改变及初步探讨其相关机制；阐述LRP对水通道蛋8-4(AOP4)、降钙素基因相关肽(CGRP)和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在脑缺血后表达量和表达部位的影响，揭示其与脑缺血损害二者之间的关系。方法：104只成年SD大鼠随机分为三组：缺血对照组(49只)、LRP组(49只)和假手术组(6只)，前两组每组随机取25只大鼠用于不同时间点(1，3，12，24h)的MRI(包括T2WI和DWI序列)检测，12只用于不同时间点各项指标的Westernblot检测，

6、12只用于不同时间点各项指标的免疫荧光检测。LRP组大鼠在行脑缺血诱导前经3个循环的右侧股动脉夹闭(15min)——恢复再灌注(15min)的缺血预处理；脑缺血对照组，暴露右侧股动脉90分钟后线栓法栓塞右侧大脑中动’脉l小时，恢复再灌注，结扎颈总动脉防止出血。分别在恢复再灌注后1，3，12，24天津医科大学博士学位论文小时行MRI检查采集T2WI／DwI图像；并结合神经行为学评分、TTC染色从行为学和形态学上进行评价。分别在恢复再灌注后1，3，12，24小时对大鼠进行心脏灌注，取脑研磨或制作脑切片用于后续的Westernblot检测和免疫荧光检测

7、。Westernblot分别检测脑缺血对照组和LRP组各时间点以及假手术组AQP4、CGRP和iNOS的表达情况。免疫荧光法分别检测脑缺血对照组和LRP组各时间点以及假手术组AQP4、CGRP和iNOS的表达情况，而后进行共聚焦显微镜观察。AQP4定位检测：AQP4与星形胶质细胞标志物GFAP共染；AQP4与微血管内皮细胞标志物CD31共染；AQP4与神经元标志物MAP一2共染。CGRP定位检测：CGRP与星形胶质细胞标志物GFAP共染；CGRP与神经元标志物MAP一2共染。iNOS与神经元标志物MAP一2共染。AQP4、CGRP及iNOS的定位

8、均用的是LRP组1h冰冻切片。结果：①LRP组行为学评分减少(1．52±0．6532VS2．60±0．6455，P<0．001，nl=n2=25)，大脑梗死面积减少(35．67i5．06％vs45．75±3．70％，P

9、于假手术组，并有随着时问的延长而上升的趋势；而另一个指标iNOS则显示出相反的规律，其在缺血对照组表达量较假手术组增多，而LRP则能够抑