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1、园艺学报2001,28(2):149~152ActaHorticulturaeSinica金合欢组织培养和快速繁殖的研究11222翟建中顾梅俏程荣昌张燕刘小军12(上海市花卉育种中心,上海201615;上海松江花桥现代农业公司,上海201601)摘要:采用金合欢(Acaciadealbata)大树顶芽、幼苗茎尖、种子小苗上胚轴和幼叶作外植体进行组培和快繁研究。结果表明:用MS+62BA6mg/L+NAA0.1mg/L+NaH2PO430mg/L可提高愈伤组织的出芽率,有利于扩大繁殖系数,而用MS+62BA2mg/L+NAA0.1mg/L
2、+NaH2PO430mg/L可以增加发枝率。珍珠岩+泥炭(1∶1)基质可促进小苗后期生长,加速成苗。关健词:金合欢;组织培养;快速繁殖;炼苗中图分类号:S68;Q813文献标识码:A文章编号:05132353X(2001)0220149204金合欢(Acaciadealbata)是澳大利亚优质观赏与经济树种,俗称银荆,属含羞草科金合欢属。它茎干挺拔,枝桠开张,小叶翠绿,为二回羽状复叶,四季常青,花色金黄,〔1〕美丽而芳香,在世界各地都有引种,在法国南部作为切花植物培育。我国几年来在苏州、上海引种金合欢长势较好,很有发展前途。目前金合欢繁
3、殖主要依靠国外进口种子,价格较贵。国外有人对柯阿金合欢(Acaciakoa)进行过组培研究,但是仅在幼苗茎尖组〔2〕培取得成功。作者对金合欢大树顶芽、幼苗茎尖、种子小苗上胚轴和幼叶进行诱导、增殖、生根与炼苗的研究,以达到成苗速度快、成本低,适于工厂化生产、快速繁殖的目的。1材料与方法1.1材料同时取4种外植体供培养用:(1)生长健壮约5年生大树上2~3cm长枝条的茎尖;(2)1年生树顶芽;(3)1年生树幼叶;(4)种子在培养皿内萌芽后取上胚轴。无菌材料的获得:从野外采集来的外植体,剥去下部较大的叶片,自来水冲洗30min;对于顶芽外植体
4、置于70%酒精中30s,取出后放入0.1%升汞溶液中消毒5min,用无菌水洗3次,在无菌条件下切取0.8~1cm长的顶芽,分别接种在诱导培养基上;种子上胚轴和幼叶外植体置于2%NaClO中10min,无菌水洗3次,然后接种在诱导培养基上。1.2组织培养和炼苗试验诱导愈伤组织培养基为MS+62BA4mg/L+NAA0.1mg/L,诱导芽与发枝的培养基以MS为基础,附加不同浓度的激素和NaH2PO430mg/L,蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.8。培养温度为(25±1)℃,光照3000lx,12h/d。幼苗种植基质用两种:(1)蛭石+
5、珍珠岩;(2)泥炭+珍珠岩。比例均为1∶1。收稿日期:2000-11-07;修回日期:2001-02-20150园艺学报28卷2结果与分析2.1愈伤组织和芽的诱导金合欢大树顶芽茎尖接种在诱导培养基上30d后,顶端抽出新芽,40d后新芽梢成为丛生状,而茎尖下部为墨绿色,暗无光泽。切取新芽梢转接在诱导培养基上产生愈伤组织,再由愈伤组织诱导获取更多的丛生芽。幼苗茎尖、上胚轴、幼叶外植体培养15d后,基部出现膨大,20d左右便可见愈伤组织在叶柄处形成,30d左右达最大,以后逐渐停止生长,其他外植体的愈伤组织在后期便出现芽的分化,具体情形如表1所
6、示。表1不同激素水平对愈伤组织的诱导与分化作用Table1Effectofdiffierenthormonesontheinductionanddifferentiationofcallus外植体组培阶段激素Hormone(mg/L)出愈率分化率平均芽高CallusinductionBuddifferetiationMeanheightExplantsCulturestages62BANAA2,42Drate(%)rate(%)oftwig(cm)大树茎尖Tipsfrombigtree诱导Initiatingaculture0.10.1
7、0525.50.5增殖Increasingpropagulus20.1052.31.2上胚轴Epicotyls诱导Initiatingaculture40.1090.548.20.7增殖Increasingpropagulus10.1090.51.5幼苗茎尖Tipsfromseedling诱导Initiatingaculture40.1071.432.30.8增殖Increasingpropagulus10.1083.21.3幼叶Littleleaves诱导Initiatingaculture40.1042.700增殖Increasin
8、gpropagulus100.100愈伤组织在继代培养中,常常可见位于愈伤组织外层的部分呈白色疏松状(称为类型1);位于愈伤组织内层的部分呈淡绿色,结构紧密(称为类型2)。将这两种类型的愈伤组织置于不同激素