电化学发光药物分析和免疫分析的研究

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1、陕西师范大学硕士学位论文电化学发光药物分析和免疫分析的研究姓名：张美宁申请学位级别：硕士专业：分析化学指导教师：张成孝2003.5.1-505099电化学发光药物分析和免疫分析的研究张美宁摘要本沦文由综述、研究报告两部分组成。第一部分为综述部分，第二部分为研究报告部分。研究报告由四部分组成。综述部分介绍了免疫分析发展的历史，电化学发光免疫分析的原理、特点以及应用于免疫分析的电化学发光体系，并对这些电化学发光体系近几年在免疫分析中的研究进展进行了概括和总结。电化学发光免疫分析是以电化学发光物标记抗原或抗体，利用抗原与抗体免疫反应前后电化学发光信号的改变，对抗原或抗体进行分析的一种免疫分析方法。

2、电化学发光免疫分析法以其无放射性，方法简便、灵敏度高、选择性好、具有可控性等优点受到人们的广泛关注。我们发现了亚硫酸氢钠一罗丹明B-Tween80能量转移电化学发光新体系，基此建立了测定亚硫酸氢钠的新方法。在中性磷酸盐缓冲溶液中铂电极上施加O．82V的恒电位时，亚硫酸氢钠有弱的电化学发光，罗丹明B和Tween80的加入，使孤硫酸氢钠氧化后形成的中间态S02"的能量转移给罗丹明B，从而大大增强了弧硫酸氨钠的电化学发光，提出弧硫酸氢钠一罗丹明B．Tween80体系为能量转移电化学发光体系。I在优化的条件下，电化学发光分析信号与距硫酸氢钠浓度在1．0×10～g／mL-8．0X、．．O-6g／mL呈

3、良好的线性关系，相关系数为O．9918．根据IUPAC规定，检测限5．0x104g／mL(S／N=3)。对1．0X104g／mL的亚硫酸氢钠进行11次测量，相对标准偏差为3．8％。用于药物VK3和白糖中亚硫酸氢钠的测定，结果满意。厂在研究皿硫酸氢钠体系电化学发光的实验中，发现诺氟沙星对哑硫酸氧钠弱电化学发光有很强的增敏作用，基此建立了测定诺氟沙星的电化学发光分析新方法。f在优化的实验条件下，分析信号与诺氟沙星浓度在8．0X10～g／mL～2．0×10。6g／m(j之间呈良好的线性关系，线性方程为A／=26+133C(C单位为10～g／mL)，相关系数为O．9977。根据IUPAC规定，检测限

4、为45×10‘8g／mL(S／N=3)。对5．0×10“g／mL的诺氟沙星进行11次测量，相对标准偏差7,J2．9％。该法用于胶囊和滴眼液中诺氟沙星含量的测定，结果满意。，，发现含氮丁酰苯类药物氟哌啶醇在1．25v的电压下大大增强了钌联毗啶的电化学发光，基此建立了偶合电化学发光法测定氟哌啶醇电化学新方法，从而扩大了钉联毗啶的应用范围。li芏优化的条件下，分析信g-与氟哌啶醇浓度在10×10’9g／m1．～9．0X10。6g／mL范同W呈线性关系，榆测限为8．0x10。og／mL。该方法成功l／地应用于药剂中氟哌啶醇的测定。y以钌联毗啶为电化学发光标记物，建立了测定小分子半抗原的多标记均相电化

5、学发光免疫分析法。I以地高辛、钌联毗啶和BSA为模型，建立了测定小分子地高辛含量的均相电化甏发光免疫分析新方法。用钉联吡啶和地高辛同时标记BSA，一个BSA上可以标记多个钌联毗啶和地高辛分子，克服了电化学发光物直接标记小分子难以将标记的和未标记的小分子半抗原分离的问题。当标记复合物Dig—BSA—Ru和抗地高辛抗体经过免疫反应结合后，电化学发光降低，游离地高辛的加入，与标记复合物上的地高辛竞争溶液中固定量的抗体，使得标记复合物Dig，BSA—Ru与抗地高辛抗体的结合量减少，引起电化学发光强度的增加，对小分子半抗原地高辛进行测定。在选定的实验条件下，当将标记复合物的浓度稀释330倍时，抗地高辛

6、抗体的溶液的稀释了8333倍时，电化学发光强度与地高辛浓度在1．0×1049／mL～1．0x10。g／mL间成线性关系，方法检测限为4．0×10“og／mL。、／、／、，／一。／关键词：电化学发光发光分析药物分析免疫分析nPharmaceuticalassayandimmunoassaybasedonelectrogeneratedchemiluminescenceMeiningZhangAbstractThisthesisincludesareviewandaresearchsection．Inthereview，thehistoryofimmunoassayisintroduced，th

7、ebasicprinciples，characteristicsandsystemofelectrogeneratedchemiluminescenceimmunoassay(ECLIA)ispresented．Moreover，theapplicationsofECLIAinrecentyearsarereviewed．ECLIAwhichusesanECLspeciesasalabeltostudythe