标记小分子均相电化学发光免疫分析法的研究

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1、陕西师范大学硕士学位论文标记小分子均相电化学发光免疫分析法的研究姓名：张海红申请学位级别：硕士专业：分析化学指导教师：张成孝2003.5.1标记小分子均相电化学发光免疫分析法的研究张海红摘要奉论文由综述、研究报告两音性分组成。第一部分包括电化学发光免疫分析法的原理、特点，电化学发光的仪器装置，电化学发光免疫分析中的标记方法、分离技术、固定化技术及电化学发光免疫分析的联用技术。第二部分主要研究了小分子标记的均相电化学发光免疫分析，建立了鲁米诺标记的地高辛均相电化学发光免疫分析法和排阻膜电极上的电化学发光免疫分

2、析法，以地高辛和鲁米诺为模型，对抗地高辛抗体和地高辛的含量进行了测定。I电化学发光分析法是基于反应物在电极表面激发，产生发光信号而进行榆测的分析方法。免疫分析因其高特异性在临床分析中-与有极其重要的地位，有着广泛的应用。电化学发光免疫分析(ECLIA)结台了电化学发光和免疫分析的特点，与其它方法相比，电化学发光免疫分析具有以下优点：无放射性：标记物的检测限低；线性范围宽．可达到6个数量级；标记物比较稳定：小分子标记物可用于标记半抗原和大分子物质．也可使用多标记技术而不影响免疫反应的特性：测量简单、·陕速，可

3、在几秒内完成。ECLIA已用于蛋白质、药物和I临J束分析中，具有广阔的应用前景。奉沦文的综述部分总结了电化学发光免疫分析法的原理、特点，详细介绍了电化学发光的仪器装置发其发展、电化学发光免疫分析中的标记方法和电化学发光免疫分析中的分离、同定化发联用技术。j研究报告由两部分组成。第一部分提出了鲁米诺标记的地高辛均相电化学发光免疫的分析方法，以地高辛和鲁米诺为模型，建立了测定抗地高辛抗体和地高辛的均相电化学发光免疫分析的新方法。根据免疫反应前后标记半抗原分子体积的变化，空间位阻的差异．引起电化学发光强度的变化，

4、对抗地高辛抗体和地高辛进行均相电化学发光免疫分析。在选定的实验条件下，抗地高辛抗体在稀释了5000～500倍问，电化学发光信号呈降低趋势。固定标记半抗原鲁米诺．地高辛复合物的浓度，加入待测半抗原，利用竞争法测定地高辛。待测地高辛浓度与电化学发光信号在2．9×10009／mL～1．4×1o．8g，mL范围内呈线性关系，方法检测限为lX10。og／mL。对5．8×10。9g，mL的地高辛进行7次测定．相对标准偏差为5．1％。对血清样品中抗地高辛抗体和地高辛含量进行了测定，结果较满意。第二部分提出了排阻膜电极上的

5、均相电化学发光免疫的分析方法，以地高辛和鲁米诺为模型．建立了测定抗地高辛抗体利地高辛含量的均相电化学发光免疫分析的新方法。根据免疫反麻前后标记半抗原分子体积的变化，能古通过膜层到达电极表面而被激发，发生电化学发光反鹿，引起电化学发光强度的变化，对抗地高辛抗体和地高辛进行均相电化学发光免疫分析。在选定的实验条件下．抗地高辛抗体在稀释了5000～500倍问，电化学发光信号呈降低趋势。固定标记地高辛浓度，利用竞争法测定地高辛，待测地高辛浓度与电化学发光信号在2．9×】0。1”g／mL～2．9x1049／mL范嗣内

6、呈线性关系，方法榆测限为1×10+10g／mL。对5．8x104g／mL的地高辛进行7次测定．相对标准偏差洳6．3％。对血清样品中抗地高辛抗体和地高辛含量进行了测定，结果较满意。T，．／／7。／／关键词：电化学发光免疫分析地高辛鲁米诺HomogeneousElectrogeneratedChemiluminescenceImmunoassayUsingaLuminophor-labeledHaptenZhangHaihongAbstractThisthesisincludesareviewandaresea

7、rchsection．Thereviewincludestheprincipleandcharacteristicsofe[ectrogeneratedchemiluminescenceimmunoassay(ECLIA)，theapparatusofelectrogeneratedchemiluminescence(ECL)，andthelabelingmethods，separatingtechnologies，immobilizingtechnologiesandcouplingtechnologie

8、sinECLIA．Theresearchcomprisesoftwosubunits．Intheresearchsection，twoECLIAmethodshavebeendeveloped，whicharebasedonthesignalchangesderivedfromsterichindranceandtheseparationbyafilmelectrode，respectively．Digoxina