炎性骨关节损伤大鼠血清、滑膜中炎性通路相关细胞因子的表达和干预研究

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1、湖南师范大学硕士学位论文炎性骨关节损伤大鼠血清、滑膜中炎性通路相关细胞因子的表达和干预研究姓名：钟文涛申请学位级别：硕士专业：运动人体科学指导教师：陈嘉勤20080901摘要研究目的：竞技体育比赛充满了激烈的对抗与竞争，在多种运动项目中，运动员由于某一次动作幅度过大或长时间大强度训练导致踝关节软组织疲劳或损伤，可能引起关节方面的病变，并且短时间内难以恢复，严重的甚至造成终身残疾，，．极大的影响了运动员的运动寿命和生活质量。关节发生炎性病变辱关节损伤的一大重要原因，而细胞内钙离子超载已经被证实与众

2、多炎性细胞的激活，以及相关酶、炎性因子的释放有极大关联，因此我们可以通过钙通道拮抗剂来抑制炎性损伤的发生。在现阶段的研究中，我们试图探讨炎性骨关节损伤可能的分子机制，以及从虎纹捕鸟蜘蛛毒液中提取的蛋白毒素一HWTX-I，作为一种新型钙通道拮抗剂，在大鼠佐剂性关节损伤模型中的抗伤害效应，为运动性关节损伤新的有效治疗手段提供实验依据。研究方法：5—6周龄健康雄性SD大鼠64只，随机分为实验对照组(n=16)、非用药组(n=16)、HWTX—I用药组(n=16)、布洛芬用药组(n=16)，采用踝关节腔

3、内注射完全弗氏佐剂制作大鼠佐剂性关节损伤模型，采用本课题组建立的大鼠硬脊膜外腔置管手术方法，利用相关的抗炎制剂进行脊髓硬膜外腔和灌胃给药干预，应用酶联接免疫吸附反应(ELISA)、逆转录一多聚酶链式反应(RT-PCR)实验技术，分别检测血清中TNF—Q(肿瘤坏死因子a)、IL-4(白介素4)和IL-IO(白介素10)含量和炎性关节中滑膜和软骨组织TNF-Q、IL-IB(白介素1B)、IL一6(白介素6)mRNA的表达水平。研究结果：(1)通过对实验大鼠进行行为学评分，证明HWTX—I硬脊膜外腔用

4、药能明显减轻炎性骨关节损伤大鼠损伤侧关节的疼痛感，其效果相对于临床上常用的钙通道拮抗剂布洛芬更加明显。(2)通过对实验大鼠进行损伤侧关节关节周长测量，证明HWTX—I硬脊膜外腔用药能明显减轻炎性骨关节损伤大鼠的关节肿胀程度，其效果相对于临床上常用的钙通道拮抗剂布洛芬更加明显。(3)ELISA法检测到血清中TNF-Q在非用药组的浓度明显高于HWTX—I用药组和布洛芬用药组，IL一4的浓度则表现为非用药组明显低于HwTX—I用药组和布洛芬用药组，而IL-IO在血清中的浓度以HWTX—I用药组最高，非

5、用药组的IL-IO浓度明显低于H1]l『TX—I用药组，但与布洛芬用药组无明显差别。(4)RT—PCR法检测滑膜和软骨细胞中TNF-Q、IL-1B、IL-6mRNA的表达水平以非用药组最高，布洛芬用药组次之，HWTX—I用药组最低，布洛芬用药组、HWTX—I用药组与非用药组之间存在非常显著性差异(P

6、验大鼠进行损伤侧关节关节周长测量，证明HWTX-I其效果相对于临床上常用的钙通道拮抗剂布洛芬更加明显。(3)HWTX-I硬脊膜外腔用药可下调炎性骨关节损伤大鼠血清中TNF—a的浓度，并上调血清中IL一4、IL-IO的浓度，其效果相对于临床上常用的钙通道拮抗剂布洛芬更加明显，证实HWTX—I具有明显的抗伤害作用。(4)H1jl『TX—I硬脊膜外腔用药可下调炎性骨关节损伤软骨滑膜中炎性细胞因子TNF-a、IL-1§、IL一6mRNA的表达，其效果相对于临床上常用的钙通道拮抗剂布洛芬更加明显，能对炎性

7、骨关节损伤病程进展起到缓解和抑制作用。(5)钙离子流动与骨关节损伤的发生发展密切相关，本研究对钙通道拮抗剂HWTX—I在炎性骨关节损伤中的作用机制进行了初步探讨，对有效防治运动性骨关节损伤具有理论和实际意义。关键词：炎性骨关节损伤，炎性细胞因子，钙通道拮抗剂，HWTX—I1．讳氏佐杈私豢私理．为付么镑黼嵋许提你2．E蛆婢扣盯一Pc艮桎，叫团萌伯矛I刁IIIABSTRACTObjective：Acommonfeatureofathleticsisfullofdrasticconflictionsa

8、ndcompetitions．Theankleparenchymaofathletesmaygethurtincertainsportsbecauseofoneover—extentactionoralongtimeintensivetraining，whichiseasytocausearthropathyandwi1nothealinashorttime．Insomeseriouscondition，itevencausesdeformity．Jointinflammationisthemo