核基蛋白22作为膀胱移行细胞癌标记物的临床应用

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1、中山大学硕士学位论文核基蛋白22作为膀胱移行细胞癌标记物的临床应用姓名：徐战平申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：戴宇平2003.5.20中山大学硕士学位论文核基质蛋白22作为膀胱移行细胞癌标记物的临床应用中山大学附属第一医院泌尿外科硕士研究生：徐战平导师：戴宇平教授摘要膀胱癌的概况膀胱瘦(Bladdercarcinoma，BC)是泌尿系统最常见肿瘤，在我国男性中居常见肿瘤的第8位，绝大多数(93．7％)为移行细胞癌(TransitionalCellCarcinoma，TCC)。曲于移行细胞癌易复发的生物学特性，所有己明确诊断的膀胱癌患者必须随访、监测，膀

2、胱镜检查是筛选、监测新发或复发膀胱癌的主要方法。外生型肿瘤易被膀胱镜检查到，而扁平的移行上皮癌、原位癌仍易被膀胱镜漏诊，因此尿细胞学检查(UrinaryCytology，UC)常作为膀胱镜检的补充。由于膀胱镜检查为有创性检查痛苦大，很多患者难以接受，而UC敏感性低，在很大程度上依赖于观察者的经验受主观因素影响较大，无法进行早期的诊断。因此一种非侵袭性、能定量的早期检测方法是非常必要的。近年来，尿液中许多大分子物质被作为膀胱癌标记物，如尿液中DNA倍体自分泌动力因子，RNA端粒酶活性，纤维蛋白／纤维蛋白降解产物(FDP)，膀胱肿瘤抗原(BTA)，核基质蛋白(NM

3、P22)等等。其中通过酶联免疫法测定尿中核有丝装置蛋白的尿NMP22的检测试剂盒，已经被美国食品和药品管理局--J(FDA)确认为可作为检测新发或经尿道切除膀胱肿瘤后快速复发的一种手段。中山大学硕士学位论文NMP22起初是作为一种预测性瘤标，而不是诊断性瘤标，多个研究中心研究乙少～一了NMP22能否作为诊断性的意义√本研究我们前瞻性收集患者尿标本筛选或检测。，膀胱移行细胞癌，观察NMP22在诊断性检测或作为辅助性筛选以及监测TCC复发——；#苎三三苎兰宝，与进展有无临床价值。

4、／2．材料与方法＼共有186例接受检测，68例血尿或膀胱刺激症状的患者接受筛选，24

5、例膀胱癌TURBt术后随访复查患者，以上两组患者均行膀胱镜检，膀胱镜检阳性或可疑患者均行活检病理证实。对55例良性泌尿系统疾病患者，20例正常健康志愿者，19例泌尿系统其他良、恶性肿瘤患者作为对照。筛选组和随访组患者收集尿NMP22标本的同时分送一份尿细胞学检查。检测试剂为美国Matritech公司产品，采用ELISA法检测尿NMP22含量。严格按照试剂盒提供的说明书，在任何侵入体内的治疗、检查之前(或之后至少5天)收集受试者的新鲜尿样，立即滴入NMP22试剂盒提供的装有稳定齐q的小瓶中，离心15min后取上清液，--200c冻存。测定前于室温自然融化，再次离

6、心25min，收集上清液后，尿样依次滴入已包被好单抗的小孔板中，室温下孵育2h后洗板，与标有Digoxigenin的单抗反应lh后洗板，再与抗Digoxigenin抗体一辣根过氧化物酶复合物继续反应30rain洗板，然后用显色剂显示，2mol／l硫酸终止反应，最后用酶标仪于A490llm处比色，尿NMP22的浓度与显色强度成正比。每次检测均对5个标准品进行测定，根据标准品A490nm处的吸光度与相应浓度绘制出标准曲线。受试样品NMP22的实际浓度经标准曲线求出。由于尿NMP22值为非正态分布，故使用中位值分析资料，以10u／mL为I临界值110移中山大学硕士学

7、位论文应用SPSS统计软件(version：lO．0forwindows)，统计推断采用非参数中的秩和检验，显著性水平确定为O．05。敏感性、特异性、阳性预测价值、阴性预测价值的比较用卡方(X2)检验。3．结果68例筛选组患者均经膀胱镜检+病理学检查证实膀胱移行细胞癌阳性患者共37例，阴性3l例；24例随访组患者经膀胱镜检+病理学检查证实膀胱移行细胞癌阳性患者7例，阴性17例；两组阳性患者共44例，阴性48例。44例膀胱癌阳性患者尿NMP22中位值为25．76u／mL(07～577．0u／mL)，48例阴性患者尿NMP22中位值2．70u／mL(0～43．4u

8、／mL)，两组相比P值为0．004。膀胱癌组、良性泌尿系疾病组、泌尿系其它肿瘤组、健康志愿组尿NMP22中位数分别为25．76u／mL(0．7～577．0u／mL)、5．50u／mL(0．1～122．1u／mL)、3．40u／mL(O～9．9u／mL)、1．84u／mL(O～8．tu／mL)，膀胱癌组与其它三组比较有显著的统计学意义P值分别为<0．001、0．001、

9、260但G2组与G3组之间无差异。Ta