茶树叶糖蛋白分离及鉴定的初步研究

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1、第25卷第2期植物研究2005年4月Vo.l25No.2BULLETINOFBOTANICALRESEARCHApri,l2005茶树叶糖蛋白分离及鉴定的初步研究*程玉祥柳参奎(东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心,哈尔滨150040)摘要茶叶是一种有益健康的保健食品,保健功能在于它有多种化学活性成分。近年来研究表明,茶叶糖蛋白可能是茶叶的保健因子之一。从茶树叶中提取了总蛋白、45%~70%硫酸铵分级总蛋白、分级蛋白SephadexG100凝

2、胶层析分离出粗糖蛋白,根据糖蛋白糖链及蛋白的对照染色鉴定出多种茶树叶糖蛋白,并从SDS胶上快速纯化了三种茶叶糖蛋白。ConASepharose4B亲和层析从茶树叶总蛋白中分离出16种天然活性糖蛋白。关键词茶树;糖蛋白;分离;鉴定;ConASepharose4B亲和层析Studyonisolationanddeterminationofglycoproteinfromteaplantleaves*CHENGYuXiangLIUShenKui(AlkaliSoilNaturalEnvironmentalScienceCe

3、nter,NortheastForestUniversity,Harbin150040)AbstractTeaisahealthyfood,beacauseithasvariousbioactivecomponents.Recentresearchindicatedthatteaglycoproteinmightbeabioactivecomponentintea.Inthisrepor,ttotalproteinswereextractedfromteafreshleaves,andcoarseglycoproteins

4、wereisolatedthroughthemethodsofammoniumsulfatefractions(45%~70%)andSephadexG100chromatography.Accordingtocontrolstainingofglycanandpolypeptide,glycoproteinsweredeterminatedbyusingPierceGelCodeGlycoproteinStainingKitandCoomassieBrilliantBlueR250,andthreeteaglycopro

5、teinswerefastpurifiedfromtheSDSgels.SixteennativebioactiveglycoproteinsweregainedfromteatotalproteinsbyConASepharose4Baffinitychromatography.Keywordsteaplan;tglycoprotein;isolation;determination;ConASepharose4Baffinitychromatography茶叶是一种非常有益健康的保健食品。绿茶料茶树叶中糖蛋白

6、种类及含量的研究显得较[1~4]的抽提物在抗癌、防衰老、防治心血管疾病等为必要。本研究从茶树叶中提取了总蛋白、45%~多个方面有着显著的功效。粗老茶中茶多糖在降70%硫酸铵分级总蛋白、分级蛋白SephadexG100血糖、治疗糖尿病方面的功效也已被人们所广泛接凝胶层析分离出粗糖蛋白,根据糖蛋白糖链及蛋白[5~8]受,汪东风从粗老茶提取的粗多糖中纯化出一的对照染色精确地鉴定出多种茶树叶糖蛋白,并从种糖蛋白,免疫活性实验表明它具有显著的活性功SDS胶上快速纯化了三种茶叶糖蛋白。另外,Co[9~11]nASepharose4B亲

7、和层析从茶树叶总蛋白中分离能,可能是茶叶的保健因子之一。目前,在茶出16种天然活性糖蛋白。从而,建立了茶树叶糖树叶中茶叶糖蛋白研究还几乎没有报道。为了进蛋白高感度准确鉴定及分离法。这一方面使得茶一步研究茶叶糖蛋白保健功能,对加工成茶叶的原基金项目:国家高技术863计划(2002AA241111)第一作者简介:程玉祥(1972),男,讲师,博士研究生,主要从事植物生物化学与分子生物学研究。*通讯作者AuthorforcorrespondenceEmai:lshenkuiliu@nefu.edu.cn收稿日期:2004-10-

8、07182植物研究25卷树叶中活性成分糖蛋白的研究变得方便、快蓝染色的蛋白带,并切下它,放入一个1.5mL的离捷;另一方面此方法能快速、简便地纯化未知植物心管中,用20%的甲醇清洗胶

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