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1、华中科技大学同济医学院硕士学位论文热休克蛋白70在缺血预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤保护中的作用硕十研究生肖营凯指导老师曾甫清教授摘要【目的]通过观察热休克蛋白70(HSP70)在大鼠肾脏单纯缺血一再灌注损伤和缺血预处理后缺血再灌注损伤中的表达，探讨其在缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤保护中的作用。([方法〕建“大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型并进行缺血预处理，45只SD大鼠随机分为3组，每组15只:(1)假手术对照组(S组);(2)缺血再灌注组(IR组);(3)缺血预处理组(PC组)，各组大鼠均先切除右肾。S组
2、仅暴露左肾，不予其它处理。IR组暴露左肾后予60分钟缺血后再行灌注，PC组先行四个循环的缺血预处理(缺血5分钟十再灌注5分钟)后再予60分钟缺血，再行灌注。IR组和PC组均在缺血再灌注模型建立后1小时、6小时、12小时取血及组织标本。S组在相应时间点直接取标本。检测肾功能(测血清肌醉值)、肾组织中自由基含量(’肾组织丙二醛含量)、肾小管病理改变(HE染色后根据Paller氏标准进行评分)以及HSP70表达的变化(免疫组化染色后利用计算机图像灰度分析法测定各组大鼠肾脏组织的灰度值)。【结果〕(1)在各时向点
3、，PC组血清肌醉值、’肾小管病理评分明显低于IR组(P<0.05)，PC组与S组比较差异无显著性(PA05);(2)’肾组织中MDA含量(nmol·mgprot-'):PC组各时间点分别为0.34土0.18,0.36+0.20,0.36+0.27，略高于S组0.32土0.29,0.34土0.24,0.33土0.28华中科技大学同济医学院硕卜学位论文0.33土0.28(P>0.05)，而IR组各时间点分别为0.65+0.26,0.67+0.29,0.69土0.31，显著高于PC组和S组(P<0.01);(3
4、)HSP70免疫组化染色:S组未见明显的阳性反应产物，PC组和IR组肾小管上皮细胞胞浆可见棕黄色阳性反应产物。计算机图像分析显示PC组各时间点灰度值91.15+7.06,94.09+5.67,95.34十6.87显著高于IR组各时间点灰度值34.12+7.84，37.45+7.78，40.56+8.02(P<0.01)。少〔结论」(1)单纯缺血再灌注损伤可引起大鼠肾脏HSP70一定程度的表达，进行缺血预处理后HSP70表达进一步增加。(2)缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤有明显保护作用，其作用机制可能与HS
5、P70本身的细胞保护作用及HSP70的细胞内抗氧化作用有关。关键词肾脏、缺血一再灌注损伤、缺血预处理热休克蛋白70})芦华中科技人学同济医学院li'd士学位论文THEROLEOFHEATSHOCKPROTEIN70INRENALISCHEMIA-REPERFUSIONINJURYINRATSAFTERISCHEMICPRECONDITIONINGPostgraduate:XiaoYingkaiTutor:Prof.ZengFuqingAbstractObjectiveToinvestigatetherol
6、eofheatshockprotein70(HSP70)inrenalischemia-reperfusioninjuryinratsafterischemicpreconditioningbyexaminingthechangeoftheexpressionofHSP70.Methods45Sprague-Dawleyratswererandomlydividedintothreegroups:sham-operationgroup(S,n=15),renalischemia-reperfusiongr
7、oup(I/R,n“15)andischemicpreconditioninggroup(PC,n=15).After1h,6hand12hrenalischemia-reperfusion,thefunctional(serumcreatinine,Scr)andmorphologicchangesandcontentofmalondialdehyde(MDA)ofthekidneyswereassessed.ExpressionofHSP70inrenalcellswasanalysedbyimmun
8、ohistochemicaltechniqueandthecomputergray华中科技大学同济医学院硕士学位论文scaleresolutionwereusedtoindirectlyreflectHSP70expression.ResultsIntheIRgroup,thelevelsofScrintheblood,MDAintherenaltissuesandthescoreoftubulesweresignifican
