脱氧鬼臼毒素生物活性及机制的研究

《脱氧鬼臼毒素生物活性及机制的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、南京医科大学硕士学位论文脱氧鬼臼毒素生物活性及机制的研究姓名：张守刚申请学位级别：硕士专业：卫生毒理学指导教师：肖杭;高蓉20070428南京医科大学硕士学位论文论文独创性声明本论文丝氢垒鱼盔盍鳖丝鲨：堡垄垫壹!盟盟壅是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均在论文中作了明确的声明并表示了谢意。专业：一者签名：名料日期：严矿论文使月授权声明本人完全了解南京医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校

2、有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。储挑料狮獬：鲤嘛孕生88南京医科大学硕士学位论文脱氧鬼臼毒素生物活性及机制的研究南京医科大学公共卫生学院神经毒理研究室研究生：张守刚导师：肖杭教授高蓉副教授(南京210029)摘要第—部分：脱氧鬼臼毒素杀虫活性及时几种酶系的影响采用药膜法、小叶碟添加法，分别研究了脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊Periplanetaamericana初孵若虫，3龄菜青rkPierisrapaeL．的生物

3、活性；采用酶促反应，离体和在体测定了脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊成虫、3龄菜青虫体内乙酰胆碱酯酶(AChE)和腺苷三磷酸酶(ATPase)活性的影响．脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊初孵若虫的杀虫活性表现出浓度、时间依赖性，24、48、72和96h的LC50分别为26．26>4．68>1．51>0．62肛g／em2；对3龄菜青虫48、72：杀P96h的Lc50分别为151．87>39．99>10．60me／L；脱氧鬼臼毒素在1—625¨mol／L范围内对AChE'活性无影响；对美洲大蠊Na+-K+-ATPase离体活性有明显抑制作用，并存在浓度

4、．效应关系，Ic50为44．9lamoFL；对3龄菜青虫Na+-K+-ATPase、Ca2+．M92+-ATPase的在体活性和美洲大蠊南京医科大学硕士学位论文Ca2+．M92+_ArPase离体活性，表现出低剂量激活，高剂量抑制的现象。试验结果提示，脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊初孵若虫．3龄菜青虫具有较强的毒杀活性；美洲大蠊、菜青，kAChEg是脱氧鬼臼毒素靶标；ATPase可能是脱氧鬼臼毒素的重要靶标之一．第二部分：脱氧鬼臼毒素对斑马鱼毒性作用友机制的研究采用静态鱼类急性毒性试验法测定了脱氧鬼臼毒素和鬼臼毒素对斑马鱼的毒性，以氰戊

5、菊酯作对照；参照脱氧鬼臼毒素96hLC50设定4个浓度梯度处理斑马鱼，48h后测定斑马鱼肌肉组织ATPase、CAT和SOD的活性。脱氧鬼臼毒素、鬼臼毒素和氰戊菊酯对斑马鱼的96hLCso值分别为3．49、3．70和0．00775mg／L，安全浓度分别为0．36，1．61和0．000803mg／L。脱氧鬼臼毒素在O．5～4mg／L浓度范围对总ATP、Na+．K+-ATPase和Ca2+-ATPase的作用趋势基本一致，表现为1—2mg／L激活，高浓度抑制作用．4mg／L能抑制总ATPase、N矿．K+-ATPase和Ca2+．A

6、TPase活性，抑制率分别为24．4％、12．3％和33．8％。脱氧鬼臼毒素在O．5mg／L时，能抑制SOD的活性，而对CAT活性没有作用．1、2mg／L组对两种酶活性均表现出激活作用，4mg／L时，SOD和CAT均被抑制，抑制率分别为34．1％和31．9％。试验结果提示，脱氧鬼臼毒素和鬼臼毒素的毒性为中毒；斑马鱼的ATPase、CAT和SOD可能是脱氧鬼臼毒素的作用靶标之一。第三部分：脱氧鬼白毒素对大鼠背根神经节神经元钙稳态的影响采用激光共聚焦显微镜、酶促反应技术测定脱氧鬼臼毒素对大鼠背根神经节神经元胞内钙离子浓度、AChE和

7、ATPasef,g-性的影响．外南京医科大学硕士学位论文液有钙时，脱氧鬼臼毒素能诱导[ca2+】i升高，并有明显的浓度．效应关系，EC50为22．2／．tmol／L．外液无钙时，脱氧鬼臼毒素也能快速诱导【ca2+】i升高，但没有浓度一效应关系。在l～625¨mo儿范围内对大鼠DRG,J／t)经元AchE活性没有影响．脱氧鬼臼毒素对Na+．K+．ATPase和Ca2+-ATPase均为抑制作用，无剂量反应关系．试验结果提示：DRG神经元AcllE不是脱氧鬼臼毒素作用靶标；脱氧鬼臼毒素诱导DRG神经元【cali升高；【ca：21i的

8、升高由外钙内流，胞内钙库ca2+释放及ATPase活性受抑制共同引起。关键词：脱氧鬼臼毒素；美洲大蠊；大鼠；斑马鱼；菜青虫；背根神经节；乙酰胆碱酯酶；腺苷三磷酸酶；过氧化氢酶；超氧化物歧化酶；钙信号；杀虫活性南京医科大学硕士学位论文StudiesOllthebi