水牛免疫乳及其免疫球蛋白的研究

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1、广西大学硕士学位论文水牛免疫乳及其免疫球蛋白的研究姓名：劳泰财申请学位级别：硕士专业：动物营养指导教师：王士长2003.5.1水牛免疫乳及免疫球蛋白的研究摘要免疫乳(ImmunemiIk)指含有特异-陛高的免疫球蛋白(1munoglobul，n简Ig)的乳汁，此乳汁能提供机体被动免疫保护(PassiMeimmuneprotection)，可调节机体自身免疫反应。本项目对生产免疫乳的免疫方法、免疫球蛋白稳定性和浓缩提取等进行研究。主要研究结果如下：1、以福氏痢疾杆菌、甲型副伤寒沙门菌、伤寒沙门菌制备死菌体疫苗对乳牛免疫，含

2、弗氏完全佐剂的疫苗对提高牛乳的抗体凝集价比弗氏不完全佐剂的疫苗高，前者对提高乳汁中特异性免疫球蛋白的凝集价的最高倍数为64倍(抗伤寒沙门氏菌)，而后者为4倍。2、以试管凝集法测定免疫乳中免疫球蛋白的凝集价为25⋯26，而在免疫前的牛乳中检测不到免疫球蛋白，但采用单向琼脂扩散法检测两者的Ig含量，没有显著性差异(P>O．05)。3、免疫乳经酸中和沉淀和33％硫酸铵盐沉析，所得的Ig粗提液于真空旋转蒸发器内，将Ig粗提液浓缩10倍，所得浓缩液的凝集价为2”(抗混合抗原)。4、牛IgG在PH为4．0—9．0范围比较稳定，在PH

3、低于4．0条件下，随着PH下降，变性率剧烈上升。7胃蛋白酶在PH2．0时对lgG活性影响很大，酶解2．5h后，检不出IgG的凝集活力，在PH3．O时，胃蛋白酶引起IgG的变性率为38．8％，凝集价为25；胰蛋白酶没有降低IgG的凝集价。在加热或酸性环境下，糖醇化合物对IgG有保护作用，随着糖类浓度的升高IgG的变性率降低；低聚果蔗糖的保护效果较好。牛IgG在PH6．4．0．05moI／LPBS中，热变性反应级数为1．0，在63。C、75。C、85％、95。C条件下，牛lgG热变性的D值分别294min、89．28min、

4、4．54min、1．31min，在此温度范围内z值为12．77℃，表观活化能E^为140．60KJ／mol。，】，妖真空二效顺流降膜法浓缩2000kg乳清，蒸发去1700kg水分，需蒸汽844．5kg，一效、二效的蒸发器的面积分别为9．88m2、27．3m2。关键词：免疫乳-免疫球蛋白热稳定性真空浓缩!圭竺竺丝查查竺墨璺塾垒墨墨兰竺皇竺竺兰————————￡!!!兰TheStudyonbuffaloimmunemilkandimmunoglobulinsinitAbstractImmunemilkisthemilktha

5、tcontainsimmunoglobulin(Ig)havinghi曲specificity．Itprovidesorganismwithpassiveimmuneprotectionalldadiustsorganismself-immunereaction．Theimmunemethodofproducingimmunemilk．extractandconcentrationoflgwerestudiedinthispaper．Themajorresultsofthestudyarefollowing：1．Dair

6、vcowswereimmunizedbydeadbacteriavaccinewhichconsistedofdysenteryFlexneribacilli,paratyphoid6JtyphoMb．ThevaccinecoutainedcompleteFreund’SadjuvanthadbettereffectthantheonecontainedincompleteFreund’Sadjuvautonraisingtheantibodytitersinimmunemilk，theformerenhancedthe

7、antibodytiterby64folds(typhoidfever)，whilethelatterwas4folds．2．Theantibodytitersinimmunemilkdeterminedbytubeagglutinatingwere2s--2a,whiletheonesinmilkpriortobeingimmunizedwasn’tdetected．ButcontentsofIgGweredeterminedbysingleradialimmunodiffusionandtheyweren’tsing

8、nificantllydifferent．3．RudeIgsegregationswereobtainedbyaddingacidand33％ammoniumsulfateandconcentratedby10foldsbyusingvaccumcircumgyratingevaporator．Theantibody