放创复合伤大鼠免疫调节变化及pHGF促愈机理的初步研究

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1、中图分类号R392UDC610硕士学位论文学校代码密级10533公开放创复合伤大鼠免疫调节变化及pHGF促愈机理的初步研究ChangesofimmunoregulationandeffectsofpHGFonpromotingwoundhealinginratswithcombinedradiation—woundinjury作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：旨0指导教师：论文答辩日期上眵．奠f6蔡金玲基础医学免疫学基础医学院崔玉芳教授杜丽D¨答辩委员会主席兰至匦中南大学2013年5月原创性声明本人声

2、明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。作者签名：彝盆：硷日期：盔丛L年』如上日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，

3、可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：害邋导师签名数日期：迎年』妇血曰放创复合伤大鼠免疫调节变化及pHGF促愈机理的初步研究第一部分放创复合伤大鼠免疫调节变化及其与创伤愈合的关系摘要目的：已知辐射可导致免疫功能受损，免疫平衡失调。然而，目前对放创复合伤难愈机制的研究仅限于创伤愈合过程的研究，而辐射所致机体免疫调节功能损伤对创伤愈合的影响尚不明确。本部分拟研究放创复合伤免疫调节功能的变化及其对创伤愈合的

4、影响，期望能为放创复合伤难愈机制及促愈治疗的研究提供参考和借鉴。方法：清洁级Wistar雌性大鼠66只，体重200+209，将实验动物分为正常对照组(正常组，Normal)、单纯创伤组(单伤组，Sw)、创伤+5Gy全身照射组(全身照射组，WTR)和创伤+25Gy局部照射组(局部照射组，WLR)共4组。采用5Gy全身照射及25Gy局部照射合并创伤的两种大鼠放创复合伤动物模型。于伤照后3d、7d、14d和28d检测外周血WBC和LYM数量；采用流式细胞术检测外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞及脾脏Treg和Thl7细胞比例；并

5、用ELISA法检测血清IFN吖和IL一4含量。结果：(1)全身照射组和局部照射组伤口愈合均显著延迟，伤口胶原含量均显著降低。(2)全身照射组和局部照射组胸腺和脾脏指数均显著低于单伤组。(3)伤照后3d和7d单伤组外周血WBC和LYM数均低于正常组；伤照后3d至14d全身照射组和局部照射组外周血WBC和LYM数均显著低于正常组和单伤组。(4)伤照后7d至28d，全身照射组和局部照射组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞比例均明显低于正常组；伤照后3d，全身照射组和局部照射组CD4+／CD8+比值均显著高于正常组和单伤组，但局部

6、照射组低于全身照射组。(5)伤照后，单伤组脾脏Treg、Thl7细胞比例及其比值均未见明显变化。伤照后3d和7d，全身照射组脾脏Treg细胞比例均显著高于正常组和单伤组，而局部照射组仅在伤照后3d出现显著增加。伤照后3d至7d，全身照射组和局部照射组脾脏Thl7细胞比例均较正常组和单伤组显著增加；导致全身照射组和局部照射组Treg／Thl7比值均出现Il明显降低。(6)伤照后3d和7d，全身照射组和局部照射组血清IFN-y含量均显著低于单伤组和正常组。伤照后不同时间各处理组血清IL．4含量均无显著变化。伤照后3d和7d，全

7、身照射组和局部照射组血清IFN-y／IL．4比值均明显低于正常组和单伤组，即Thl／Th2平衡向Th2型免疫反应偏移。结论：(1)放创复合伤大鼠伤口愈合显著延迟。(2)单纯皮肤创伤对机体免疫调节功能的影响不明显。(3)合并辐射损伤后，CD4+、CD8+T淋巴细胞比例均显著降低，而CD4+／CD8+比值显著升高；Treg、Thl7细胞比例显著增加，Treg／Thl7平衡向Thl7偏移；IFN-7含量明显降低，Thl／Th2平衡模式失调，且合并全身照射时这些变化更为明显，致使机体免疫调节功能紊乱和内稳态失衡，这是导致放创复合伤

8、愈合延迟的重要免疫学机制。111第二部分pHGF促进放创复合伤愈合相关机理的初步探讨目的：本实验室前期研究表明，携带人肝细胞生长因子的重组质粒(pHGF)对放创复合伤具有很好的促愈作用，但其促愈机理尚未完全阐明。本部分拟从免疫学角度探讨pHGF促进放创复合伤愈合的机制，期望能为pHGF的临床实验研究提供