酒窖酵母中羰基还原酶的研究

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1、ResearchontheCarbonylr—e—————d—————u——————c————t————a——．，．s．．．．e．．．．．．．i．．．n．．．．．．．．t．．．．h．．．．．．e．．．．．．Y．．．．．．．e．．．．．a．．．．．s．．．．t．．．s．．．．．．．f．．．r．．．．o．．．．．．m．．．．．．．．．．．C．．．．．．．h．．．．．．i．．．n．．．．．．．e．．．．s．．．．e．．．——，，．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．_●●●_●●__^___

2、____________________________________________________________________________________________。一ByYeXingADissertationSubmittedtoTheUniversityofChineseAcademyofSciencesInpartialfulfillmentoftherequirementForthedegreeofMasterofBiologicalEngineeringChengduInstituteofBiologyChin

3、eseAcademyofSciencesApril，2013目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一Abstract．．．．⋯．⋯⋯．．⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯lIl第一章概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11．1羰基还原酶简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．2羰基还原酶在生物催化过程中的应用实例⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．3本课题的研究思路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯6第_章筛选底物的选择及检测力‘法的确立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．92．1筛选底物的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．1．13，5．双_三氟甲基苯乙酮⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．1．23．羰基．3．(2．噻吩基)丙酸甲酯和N一甲基．3一羰基一3．(2．噻吩)丙酰胺⋯⋯⋯⋯．．102．1．3(E)．0【．苯丁烯吖．酮⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．112．2底物3a及底物4a及对应消旋醇的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．122．2．

5、1以2．乙酰噻吩为原料合成底物3a，即3．羰基．3．(2．噻吩基)丙酸甲酯⋯⋯⋯122,2．2以底物3a为原料合成底物4a，即N．甲基．3．氧．3．(2．噻吩基)丙酰胺⋯⋯⋯132．32．4第三章3．12．213底物3a及4a对应消旋醇标准样品的制各⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14底物及对应产物检测方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．152．3．1苯乙酮⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．3．23，5．双三氟甲基苯乙酮⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．162．3．33一羰基．3．(

6、2．噻吩基)丙酸甲酯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．172．3．4N．甲基一3一羰基．3．(2一噻吩)丙酰胺⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．3．5(E)．Ⅱ．苯丁烯一Y．酮⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．18小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一20白酒酿造微生物菌种库中羰基还原酶的筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l菌株筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．213．1．1底物la(苯乙酮)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯213．1．2底物2a(3，5．双三氟甲基苯乙酮)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．233．1．3底物3a(3．羰基．3．(2．嚷吩基)丙酸甲酯)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一243．1．4底物4a(N．甲基．3一羰基．3．(2．噻吩)丙酰胺)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243．1．5底物5a((E)．0t．苯丁烯．1，．酮)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．253．2小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．26第四章粘红酵母Rhodotorulasp．2．154中关键羰基还原酶的分离纯化⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯294．1引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．294．1．1生物催化合成度洛西汀手性醇中间体的应用前景⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29