橄榄绿链霉菌E86木聚糖酶的固定化及低聚木糖制备研究

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1、中国农业大学博士学位论文橄榄绿链霉菌E-86木聚糖酶的固定化及低聚木糖制备研究姓名:艾志录申请学位级别:博士专业:食品科学指导教师:李里特;江正强20040601中国农业大学博士学位论文摘要酶工艺简单、条件温和、通过改变环境pH值可以很容易的实现在溶解状态下进行酶反应,降低固定化酶扩散限制,改善酶与底物的亲合性,而在不溶状态下进行酶与酶解产物的分离和重复利用。采用稀碱液预处理玉米芯则可以简单有效地脱除木聚糖结合的木质素。改善底物与酶的亲和性,消除了木质素的屏蔽效应对固定化酶作用的影响,两者的结合使得固定化酶能高效利用玉米芯中的木聚糖生产低聚木糖。本研究为利用固定化酶直接水解玉米芯生产低聚

2、木糖开辟了一种全新的思路,为工业化利用固定化酶法生产低聚木糖提供了基础。因此可以期待其在工业化低聚木糖生产中发挥其应有的作用。②在国际上首次报道采用环氧基载体固定化木聚糖酶得到良好效果.并经连续水解玉米芯汽爆液生产低聚木糖证明了其可行性。关键词:木聚糖酶固定化酶橄榄绿链霉菌聃6低聚本糖2AbstractAccordingtotherequestofpracticalapplications,thearticlestudfedtheimmobilizationtechniquewhichaimedtoovercomethekeytechnicalproblemsdudngtheindust

3、rialproductionofxylooligosacchafidesusingimmobilizedxylanase.Thebestcarrierswereselectedfromthirtykindsofcarriers.Theconditionsforimmobilizationwereoptimized.Theimmobilizedenzymesweresystematicallycharacterizedintermsoftheircatalyticactivity,kineticparameters,thermalstabilityandapplication,etc.Th

4、exylooligosaccharideswereproducedfromthehydrolysisofbothdilute—alkali—treatedcorncobandsteam-explodedcomeobliquorwithimmobilizedenzymes.Theoptimalhydrolysisconditionsforbothsubstrateswereinvestigated.Resultsshowthat:1.Amongthethirtykindscarriersstudied,fourcarriersshowedrelativelygoodimmobilizati

5、onseffectonthexylanasefromStreptomycesolivaceoviridisE-86,namelyEudragitS-100、EupergitCandmacroporouspolystyreneresinD380.2.Thisisthefirstreportonthemethodofimmobilizingenzymeusingreversibilitysoluble—insolublepolymerin0urcountry.ThepolymershowedagoodimmobilizingeffectonthexylanasefromStreptomyce

6、solivaceoviridisE-86.Theimmobilizedxylanaseretained91.84%ofitsactivityuponimmobilizationby1%EudragitS一100.Theactivityoftheimmobilizedenzymereachedto74.68U/ml,whichwashighestinourcountry.3.Thisisalsothefirstreportonxy]anaseimmobilizationusingoxirane-groupcarrier.When232Uoffreeexylanasewasimmobiliz

7、edusingof1gcarrierinthepresenceofpotassiumphosphatebuffer(1M,pH5.8)for36~48hours,therecoveryandimmobilizedxylanaseactivitywere35%and82U/g,respectively4.Comparedtothefreeenzyme,theoptimumpHofimmobilizedxylanasefromtheSt

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