雷公藤内酯醇抑制小鼠EAE与其下调脾细胞INFγ表达和上调IL10的分泌有关

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1、雷公藤内酯醇抑制小鼠EAE与其下调脾细胞INFγ表达和上调IL10的分泌有关作者：樊红翠,任晓蓉,尉杰忠,郭敏芳,纪宁,孙永胜,梁丽云,马存根【摘要】　　目的:探讨雷公藤内酯醇（triptolide,Tri）治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）的有效性和可能机制。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为EAE组(28只)、Tri治疗组（20只）和佐剂组（18只）。EAE组和Tri治疗组用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白3555多肽（MOG3555）免疫建立EAE模型,佐剂组以等量生理盐水代替。Tri治疗组于免疫后5d开始按100μg/(kg·d)腹腔注射Tri,

2、EAE组和佐剂组等量的生理盐水作为对照。观察3组小鼠的发病情况以及病理变化,免疫后18～20d无菌分离脾淋巴细胞,分2组,分别为对照组（只加200μL的细胞悬液）、实验组（细胞悬液中加入MOG3555每孔终浓度为10mg/L）,并将各组细胞悬液接种于96孔板中置于37℃、50mL/LCO2条件下孵育48h。用MTT法检测MOG3555刺激前后各组脾淋巴细胞的增殖情况,ELISA检测各组细胞培养上清液中细胞因子INFγ、IL17、IL10和IL4的水平。结果:Tri能够显著改善EAE的发病,减轻炎性浸润,并且可抑制MOG3555诱导的脾淋巴细

3、胞增殖反应（P<0.01）及INFγ的分泌（P<0.05）,促进IL10的分泌（P<0.05）,而对IL17和IL4的分泌没有显著性影响。结论:Tri可以有效抑制小鼠EAE,15这种抑制可能与其对脾细胞中INFγ表达的下调及对IL10分泌的上调作用密切相关。【关键词】雷公藤内酯醇;实验性自身免疫性脑脊髓炎;淋巴细胞增殖;INFγ;IL17;IL10　　［Abstract］AIM:Toexplorethetherapeuticeffectivityandthepossiblemechanismoftriptolide(T

4、ri)onexperimentalautoimmuneencephalomyelitis(EAE).METHODS:AllfemaleC57BL/6micewererandomlydividedintoEAEgroup(28),Tritreatedgroup(20)andadjuvantgroup(18).MiceinEAEandtreatedgroupswereimmunizedwithmyelinoligodendrocyteglycoproteinpeptides3555(MOG3555),adjuvantgroupwasinjectedatt

5、hesametime,butinsteadofMOG3555withnormalsaline.Triwasintraperitoneallyinjectedinthedosageof100μg/(kg·d)intreatedgrouponday5postimmunization(p.i.),andmiceinEAEandadjuvantgroupinjectedwithnormalsalineascontrol.Theclinicalfeatureandpathologicalchangeswereobservedandthespleniclymph

6、ocyteswerepreparedondays1820p.i.Thecellculturesweredividedintothecontrolgroup(only200μLofcellsuspension)andtheexperimentalgroup(cellsuspensioninthepresenceof10mg/LMOG3555).Thenallofthemwereinoculatedin96wellflatbottomplatesunder3715℃,50mL/LCO2.After48h,theproliferationassaywa

7、sdeterminedbyMTT,andthesupernatantswereharvestedforthedetectionofINFγ,IL17,IL10andIL4byELISA.RESULTS:TritreatmentshowedansignificantlyprotectiveactiononEAE.AftertheinterventionofTri,thelevelsofIL10wereincreased(P<0.05),butthesecretionofINFγandproliferationresponseofsplen

8、iclymphocytesinducedbyMOG3555werestatis