鼻咽癌病人血浆、外周血细胞及癌组织EpsteinBarr病毒DNA定量分析

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1、中山大学硕士学位论文鼻咽癌病人血浆、外周血细胞及癌组织Epstein-Barr病毒DNA定量分析姓名：张玉申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：吴秋良2003.5.22整塑鲞壅查垒鍪：叁鉴壅堑塑墨赛篓篓塑窒鳖蝥鐾煮塑坚鳖叁塞茎黧蹩———————．———』兰!jg鹜鼻咽癌病人趣浆、外周盘缨施及癌缝织Epstein～Barr病毒DNA定量分析专业。肿瘤学褒±生；张玉导师；受秋良教授摘要露戆比较研究鼻咽癌瘸人放疗前厨衄浆、外周觚细胞EBV-DNA水平麴变纯及痰缀织蔓Bv￡黼A拳孚，分辑宅翻与奏骥癌兹臻痰趱交纯麴关系，探讨它嚣j在鼻旗癌诊洛工襻唪浆徐谴。瓣攀}零方法收集我

2、院确诊的197例初诊姆咽癌病人澈疗前后的舭浆和外周媳缨您，及遂些痰人中鹳翅鼻骥壤若蟮缝织，收集逮些瘸入熬蘩臻资料(包括年龄、性烈、TNM努鲻、斑清中EBVVCA—IgA和EA．IgA抗体滴度、放疗后临床疗效评价)。收集75例正常人血浆殿外周m纲藤餐孵戳我浚渗赣荛橐蟋漫洼灸磊媾缝缓，俸舞霹爨爨。分舅§接葵血浆、外劂舷细胞和缌织DNA，用real．timePCR方法定最检测EBV-DNA：对石菇组织片擞EBERs鞭位杂交，诗篓鞠性率秘每张缝织黄土隔谴镪愆数占缀缀片总缩懑数的毙镪。璺翌整塞叁童鍪：叁整壅塑蕉墨壁篓篓婪￡塑i翌登篓蕉鼗型皇窒量茎堑———————————主奎i

3、!篓f{结果i．鼻霭癌瘸入矗桨EBV-DNA定鐾检测缝蒙1．1．鼻咽瘸瘸人血浆EBV-DNA水平放疗前(中位数42000拷贝，ml，靼分位数范豳2420-300000拷贝／m1)显著懿予敖疗赫(中位数0拷贝矗硝，瞪分位数范隧0-0拷援／m1)和疆常人(中像数0拷灵／ml，四分位数0-0拷贝／m1)，放疗前检出攀(77％，147／191)也显著离子敖疗瑟(t8．8％，31／165)囊正常久≤t2％，9／75)。放疗后鼻咽癌病人和狂=常入血浆EBV-DNA水平和检出举均无显著性差别。1．2。91．36％<146／160)皎彝咽癌瘾入藏疗屠趣浆EBV-DNA水平降低(其中

4、81，48％放疗后转阴，9．88％放疗后下降但米转阴)，8。强％(14／160)鹣瓣人敖疗嚣舞褰。l。3，临床TNM分期，I、lI、II、IV各期彝咽癌病人放疗前血浆EBV-DNA水平中饿俊分别为0、10150、64000、144500拷贝／ml：捡窭率分裂秀33。3％、67。5％、8l。7％、84。6％，EBV-DNA隶平及检出举均随分期越晚而显著性升高。NO、N1、N2、N3各期放疗蘸血浆EBV-DNA墩孚孛穗傻分裂茭6700、46000、45000、254000拇贝／ml，黧中Nl和N2期放疗黼斑浆EBV-DNA水平无显著性差异，N3期显著高于N1+N2期，N

5、I+N2期又显著高于NO期；各麓捡离零分鬟为64。1％、74。2％、84。9％、93．3％，N分期越晚检出率越商。2。鼻瞩瘩瘸人努属巍镯麓EBV-DNA检测结粱2．1．鼻咽癌瘸人外周血细胞EBV-DNA水平在放疗前、放疗后和正常灭三组润均无显著键差异(孛镣数均秀0#)9q／aetin，蕊分茬鼗墨蹩壅塞盔垒莲：叁墨垒塑整垄篓篓堡兰￡墅黧墼塞墨銎坠塞萋坌堑——————————』墼兰!堕范围均为0-0拷／actin)．检出搴分别为22．6％(42／186)、14．3％(23／161)、16％(12／75)，三组间亦箢显著性差别。2．2．睡藤TNM分期，l、lI、lll、l

6、V翔粪咽癌瘸人努翔盘细耱EBV-DNA水平中位值均为0拷I)2／actin，四分位数范围均为0-0拷贝／aetin，各组间无显著性差异；各期检出率分别为11．1％、10+8％、25％、27．5％，III+IV褒捻爨率(41．∞％，32／78)霞著蹇予I+ll勰(16。33％，8／49)。NO、NI、N2、N3期放疗前外周血细胞EBV-DNA水平中位值和豳分位数范围亦均为0拷贝／actin，各组间无显著性差裂，梭出率瞧无显著性差别(检爨率分剃失27％、20+3％、18．9％、25％)。2．3．巢式PCR宠性检测，鼻嘲癞病人放疗前外周血细胞检出率为75％(54／72)。

7、其中36例real-timePCR定薰分橱阳性痍铡，巢式PCR34例阳性；36例real．timePCR定量分析阴性病例，巢式PCR20饲阳性。提示real—timePCR方法检测外周血细胞EBV-DNA灵敏度低予巢式PCR方法。2．4．巢式PCR定性检测，鼻咽瘸病人放疗前外周血细胞EBv-DNA临床分期为Ill+IV期的裣窦率为84．3％(43／51)，显著高于I+II期(检出率为50％，7／14)。NO、N1、N2、N3期检蹬率分别为72+2％(13／18)、68．2％(15／22)、78．9％(15／19)、100％(7／7)，各组阉无整著性差剜。3．鼻咽