灵芝多糖对糖尿病大鼠肾组织TGFβ1和COⅣ表达的影响

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1、灵芝多糖对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1和CO-Ⅳ表达的影响作者：毛春谱，李小毅，张红梅，林桂芬，李伟【摘要】目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)及Ⅳ型胶原（CO-Ⅳ）在糖尿病大鼠肾组织中的表达及灵芝多糖干预后的影响。方法腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导大鼠造成糖尿病模型，分组予不同剂量灵芝多糖（GLP）进行治疗性灌胃。8周后，用免疫组化方法和RT-PCR方法检测各组大鼠肾皮质TGF-β1、CO-Ⅳ的蛋白和mRNA表达。结果糖尿病组大鼠肾小球TGF-β1、CO-Ⅳ蛋白和mRNA表达较正常对照组明显升高（P＜0.01）；灵芝多糖各

2、组较糖尿病组表达降低（P＜0.01）。结论灵芝多糖可能通过下调糖尿病大鼠肾脏中TGF-β1和CO-Ⅳ的表达，减少细胞外基质积聚，起到对糖尿病大鼠肾脏保护作用。【关键词】灵芝多糖；糖尿病肾病；转化生长因子β1；Ⅳ型胶原　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheexpressionsoftransforminggrowthfactor-Beta1(TGF-β1)andtypeⅣcollagen(CO-Ⅳ)inthekidneyofdiabeticratsandtheeffectsofGanodermalu

3、cidumpolysaccharides（GLP）onsuchchanges.MethodsDiabeticratmodelwasinducedby10streptozocin（60mg/kg）andtheratsweredividedinto5groupsrandomlyandtreatedwithdifferentdoseGLP.8weekslater，theexpressionofTGF-β1andCO-ⅣinkidneytissuewasdeterminedbyimmunohistochemistryandRT-PCRme

4、thods.ResultsComparedwithgroupC，theexpressionsofproteinandmRNATGF-β1、CO-Ⅳsignificantlyincreasedinglomeruli（P＜0.01）.Theabnormalexpressionsoftheseproteins、mRNAweredramaticallyimprovedindiabeticratsbyGLPtreatment（P＜0.01）.ConclusionGLPhassomerenalprotectiveeffectondiabeti

5、crats，throughinhibitionofexcessivedepositionofglomeruliextracellularmatrixbyinhibitingtheexpressionofTGF-β1anddecreasingthesynthesisofCO-Ⅳ.　　Keywords：Ganodermalucidumpolysaccharides；Diabeticnephropathy；Transforminggrowthfactor-β1；TypeⅣcollagen　　随着人们生活水平的提高和人口的老龄化，糖尿病的

6、发病率逐年升高。糖尿病肾病（diabeticnephropathy，DN）是糖尿病最重要的慢性微血管并发症之一，也是糖尿病主要的死亡原因之一。目前，单纯西药尚不能有效阻止糖尿病肾损害的自然进程，灵芝是担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌，为滋补强壮，扶正固本的珍品，它的有效成分非常丰富，主要有灵芝多糖（Ganodermalucidumpolys10accharides，GLP）、三萜类化合物、灵芝酸、腺苷等，其中GLP是最有效的活性成分之一。灵芝的药理活性大多和GLP有关，其具有广泛的药理活性［1］，能提高机体免疫力，提高机体耐缺氧能力，消

7、除自由基，抗氧化［2］，抗辐射和降低血脂［3］等作用，但对DN的作用报道很少。本研究采用免疫组化和RT-PCR方法观察灵芝多糖不同剂量组对糖尿病大鼠肾组织的转化生长因子β1（transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1）和Ⅳ型胶原（typeⅣcollagen，CO-Ⅳ）的表达变化，旨在探讨GLP对DN的保护机制［4～10］。　　1材料与仪器　　　　清洁级雄性SD大鼠50只，体质量180～220g（徐州医学院实验动物中心）。STZ（美国Sigma公司），灵芝多糖（河北保定施达科生物工程技术有限公司，批号：RM

8、051215）。一抗分别为兔抗大鼠TGF-β1、CO-Ⅳ抗体、SP-6001试剂盒及DAB试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司），TotalRNA提取试剂、RT-PCR试剂盒（大连宝生物有限公司）。LEICAQwin图像处理与分析系统（德国），罗氏