二烯丙基二硫化物对HL60白血病细胞株VEGF表达及分泌的影响

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1、二烯丙基二硫化物对HL-60白血病细胞株VEGF表达及分泌的影响作者：谢熠，范自力，姚晨姣，谭三勤，赵亚丽【摘要】为了研究二烯丙基二硫化物（diallyldisulfide，DADS）对白血病HL-60细胞株VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白分泌的作用，并从影响VEGF生成的角度探讨DADS的抗白血病机制，应用ELISA法检测药物作用前后白血病HL-60细胞培养上清液中VEGF蛋白的含量；RT-PCR法检测药物作用前后白血病HL-60细胞VEGFmRNA的相对含量。结果表明：HL-60细胞中均有VEGFmRNA的表达和VEGF蛋白的分泌；与空白对照相比，DADS3个浓度组（0

2、.625，1.25，2.5μg/ml）作用HL-60细胞48小时和72小时均能下调HL-60细胞VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白的分泌（P<0.01）。3个浓度组间差异显著（P<0.01），其下调HL-60细胞VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白的分泌效果与浓度相关（r>0.9，P<0.01）。结论：DADS可能通过抑制VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白的分泌发挥抗白血病效应。【关键词】二烯丙基二硫化物　　EffectofDiallylDisulfideonExpressionandSecretionofVEGFinHL-60LeukemicCel

3、ls13　　AbstractThestudywasaimedtoinvestigatetheexpressionofVEGFmRNAandVEGFproteininHL-60cellstreatedwithdiallyldisulfide(DADS)，andtoexploretheantileukemicmechanismofDADSinrespectofVEGFproduction.Semi-quantitativeRT-PCRandELISAwereusedtodetecttheexpressionofVEGFmRNAandsecretionofVEGFproteininH

4、L-60celllinestreatedbyDADSrespectively.TheresultsshowedthattheexpressionofVEGFmRNAandsecretionofVEGFproteinwerefoundinHL-60cells.TheexpressionofVEGFmRNAandsecretionofVEGFproteininHL-60cellscouldbedownregulatedbytreatmentwith0.625，1.25，and2.5μg/mLDADSfor48and72hoursandtheeffectshadadosedepend

5、entrelationship（r>0.9，P<0.01）.ThedifferencesbetweenDADStreatedHL-60cellgroupsandthecontrolgroupwerestatisticallysignificant（P<0.01），therewerealsostatisticallysignificantdifferencesamongthreeDADS-treatedHL-60cellgroups（P<0.05）.ItisconcludedthatDADSeffectivelyinhibitstheproliferati

6、onofhumanleukemiacelllineHL-60cells;DADSexertsitsantileukemiceffectsbyreductionoftheexpressionofVEGFmRNAandVEGFproteinsecretion.13　　Keywordsdiallyldisulfide;HL-60cell;leukemia;vascularendothelialgrowthfactor全反式维甲酸（ATRA）已成为治疗急性早幼粒白血病的首选药物，但也有其局限性，并且还会发生维甲酸综合征不良反应，因此寻找毒副作用低的抗白血病的药物仍是当前研究的重要课题。

7、已有研究证明，大蒜中的一种脂溶性的有效成分二烯丙基二硫化物（diallyldisulfide，DADS）对乳腺癌、皮肤癌、肝癌、肺癌、胃癌、食管癌、结肠癌和白血病等细胞均有抑制作用［1-3］，但其作用机制尚未明了。本研究初步探讨DADS对HL-60白血病细胞株抑制作用的可能机制。　　材料和方法　　细胞系及试剂　　人急性粒细胞性白血病细胞系HL-60细胞，由中南大学湘雅医学院细胞中心提供。RPMI1640培养液为美国Gibco公司产品。胎牛血清为杭州四季青生物工程公司产品。DADS为美国Flu