Claudin2在大肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系

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1、Claudin-2在大肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系作者：张东杨春杨银学张宁妹李海蒋波马晓强杨萍【摘要】目的观察紧密连接蛋白Claudin-2在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌发生和发展的关系。方法运用免疫组化技术检测Claudin-2在大肠癌及癌旁组织、正常组织中的表达，并分析Claudin-2蛋白表达与大肠癌临床各病理特征的关系。结果Claudin-2在大肠癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织及正常组织(P<0.05)。Claudin-2在大肠癌组织中的阳性表达与肿瘤的分化程度、Dukes分期密切相关(P<0.05)。结论大肠癌与癌旁组织及正常组织相比，Cla

2、udin-2表达阳性率明显升高，其改变在大肠癌的发生发展中可能起重要作用。【关键词】紧密连接蛋白;大肠癌;免疫组织化学　大肠癌是临床上最常见的消化道恶性肿瘤之一，严重地威胁着人类的健康。大肠癌的发病率男女均处于恶性肿瘤的第3位，其中在西方发达国家，大肠癌的发病率处于第28位[1-2]，在我国病死率列癌症死因的第5位[3]。目前，大肠癌的病因和发病机制尚无明确定论，因此从分子水平研究大肠癌的发病机制，寻找与大肠癌发生、发展密切相关的致病因素，以达到早期预防、早期诊断、早期治疗的目的，提高5年生存率具有重要的现实意义。　　紧密连接是细胞之间主要的黏附形式之一，对维持机体内环境的稳定，

3、保持上皮细胞的极性，调节细胞的运动、增殖、分化，以及细胞功能的发挥均起重要作用。近年已证实claudins蛋白是构成紧密连接的主要骨架蛋白[4]，其异常表达可能在多种疾病的发病过程中起重要作用。目前研究较多的有claudin-1,-3,-4,-7和-16等，对于Claudin-2却鲜有报道。我们应用免疫组化技术对大肠癌、癌旁及正常组织中Claudin-2进行检测，观察其在大肠癌组织中的表达。　　1材料与方法　　1.1临床资料选自宁夏医科大学附属医院2008年11月-2009年6月间，经病理证实为大肠癌的手术标本35例。其中，男19例，女16例，年龄25～82岁。高分化腺癌9例，中

4、分化腺癌16例，低分化腺癌10例。Dukes分期：A期3例，B期12例，C期16例，D期4例。肠管离体后立即取材，每例标本癌组织取1块，癌旁组织(距肿瘤切缘外3cm)1块，正常组织(距肿瘤10cm以上)1块。各约0.5cm×0.5cm×0.5cm大小。全部病例术前均未行放、化疗，临床病例资料完整。　　1.2试剂与仪器8一抗：鼠抗人claudin抗体(Zymed公司，美国);S-P免疫组化染色试剂盒(即用型免疫组化ElivisionTMplus广谱试剂盒)购自福州迈新生物技术公司;PBS液(pH7.4);95%乙醇;10%PLL;石蜡切片机(LEICAKM2245切片机，德国);脱

5、水机(LEICAKM300，德国);NikoneclipseE800显微镜(日本产)。　　1.3免疫组化标本均经10%中性甲醛固定，石蜡包埋，5mm连续切片，常规脱蜡、水化，用常规S-P法进行免疫组织染色，分别检测Claudin-2在大肠癌组织、癌旁组织和正常大肠组织中的表达。一抗为鼠抗人Claudin-2抗体，严格依照试剂盒使用说明操作。　　1.4免疫组化阳性结果的判定所有石蜡切片由两名病理科医师独立评判后综合评定。Claudin-2蛋白阳性反应为在细胞浆呈棕黄色颗粒。评分标准：阳性细胞数<25%时记为(-)，26%～50%为(+)，51%～75%为(++)，>75

6、%为(+++)。　　1.5统计学方法采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1Claudin-2在大肠癌组织、癌旁组织及正常组织中阳性表达的免疫组化结果8　　免疫组化染色结果显示，大肠癌组织中Claudin-2阳性染色为棕黄色，主要定位于细胞浆中。Claudin-2在大肠癌组织、癌旁组织及正常组织中的阳性表达率分别为68.57%(24/35)、42.86%(15/35)和25.71%(9/35)，见图1-6(封4)。Claudin-2在大肠癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织和正常组织，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。表1Claudi

7、n-2在大肠癌、癌旁组织及正常组织中的表达　　2.2大肠癌组织中Claudin-2表达与大肠癌临床病理特征的关系　　大肠癌组织中Claudin-2阳性表达率在患者年龄、性别、肿瘤大小分组中的差异均无统计学意义(P>0.05);在不同的Dukes分期和分化程度分组中Claudin-2的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。表2大肠癌组织中Claudin-2表达与临床病理特征之间的关系　　3讨论8　　肿瘤的发生、发展是一个由多基因参与和受多因素影响的复杂过程