香烟烟雾提取物致小鼠骨髓细胞微核作用研究

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1、香烟烟雾提取物致小鼠骨髓细胞微核作用研究【关键词】香烟烟雾提取物小鼠骨髓细胞微核作用　我们以前的研究已证实香烟烟雾二甲基亚砜(DMSO)提取物可致小鼠生殖细胞染色体损伤[1]，同时小鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平升高[2]，认为香烟烟雾提取物可加剧小鼠体内的过氧化过程，并因此导致生殖细胞突变，对其后代的健康带来可能的威胁。香烟烟雾DMSO提取物加剧过氧化作用也可能作用于体细胞的遗传物质，并导致其损伤。因此，我们对香烟烟雾DMSO提取物致小鼠骨髓细胞微核的产生情况进行了研究，报告如下。　　1材料与方法　　

2、1.1香烟烟雾提取液制备　　用市售某品牌香烟去掉过滤嘴点燃，以流水产生负压吸烟，调节水流控制吸烟速度，每支烟在10min左右燃完。用10%DMSO做为提取液，以称量法测得提取液中提取物的含量，用蒸馏水稀释备用。　　1.2动物处理4　　昆明种小鼠，由包头医学院动物室提供，雄性，体重21±1g，鼠龄90d。将动物在实验室饲养2周后，选健康者随机分为3个观察组(A、B、C)、1个空白对照组和1个溶剂对照组，每组各10只动物。A、B、C观察组于每日晨1次按体重(mg/kg)分别腹腔注射50.0、25.0、12.5mg香烟烟雾提取物(

3、溶于0.3mL10%DMSO中)，连续染毒5d，第5d下午处死动物。溶剂对照组按观察组方法腹腔注射10%DMSO，每次0.3mL;空白对照组小鼠与染毒组小鼠同时喂养，但不作任何处理;两对照组动物与染毒组动物同时处死。在整个实验过程中，各组实验同时进行，所有动物的饲养条件均完全相同。　　1.3制片及观察方法　　断髓处死小鼠，取股骨，制备骨髓涂片，经染色后采用盲法阅片，选择分散良好、形态清晰的骨髓嗜多染红细胞进行观察，每只小鼠观察1000个嗜多染红细胞，记录出现微核的数量。　　1.4资料处理　　全部实验数据均用SPSS/PC12

4、.0统计分析软件进行方差分析。　　2结果4　　空白对照组嗜多染红细胞微核率与溶剂对照组比较差异无统计学意义(F=0.42，P>0.05)，说明溶剂DMSO对嗜多染红细胞中微核的产生没有作用。观察组中的A、B、C三组与空白对照组比较，嗜多染红细胞微核率差异均有统计学意义。见表1。表1香烟烟雾提取物致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核情况　　3讨论　　本实验结果显示，空白对照组与溶剂对照组间小鼠嗜多染红细胞微核率间差异无统计学意义，说明溶剂DMSO对嗜多染红细胞中微核的产生没有作用，用DMSO做为溶剂不会影响或干扰香烟烟雾提取物诱发

5、小鼠骨髓微核的产生情况，本实验的方法可靠。用香烟烟雾提取物染毒的A、B、C三组嗜多染红细胞微核率与空白对照组比较，微核率均高于空白对照组，差异均有统计学意义，说明3个剂量的香烟烟雾提取物均可诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞产生微核。4　　微核被认为是染色体在外来因素作用下发生断裂而产生的染色体断片，在细胞分裂期不能随染色体进入子细胞核，遗留在胞质中形成的核性物质，呈圆形或椭圆形，着色与核一致或略浅。微核出现增多即意味着染色体发生了异常的断裂，因此本实验中染毒香烟烟雾提取物后的小鼠，其骨髓嗜多染红细胞微核率增高即说明香烟烟雾提取物具有

6、损伤染色体的作用，结合我们前期研究工作结果可以认为，香烟烟雾提取物对体细胞、生殖细胞均具有遗传物质损伤的作用，而且这种作用很可能与香烟烟雾提取物加剧小鼠体内过氧化作用有关。【参考文献】　[1]吴玲，陈晓东，贾玉巧，等.香烟烟雾提取物致小鼠生殖细胞的遗传学损伤[J].包头医学院学报，2001，17(3)：173-174.　　[2]陈晓东，吴玲，罗绥兰.香烟烟雾提取物致雄性小鼠生殖细胞染色体畸变与睾丸组织中SOD、MDA含量的变化[J].预防医学文献信息，2002，8(1)：46-47.4