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时间:2018-11-14
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1、维生素C、维生素E拮抗香烟烟雾提取物致小鼠精子畸【摘要】目的:研究维生素E(VE)、维生素C(VC)对香烟烟雾提取物导致小鼠精子畸形的拮抗作用。方法:将香烟烟雾中提取物配成的100.0、50.0、25.0、12.5和6.2mg/kg体重剂量,分别给予昆明种小鼠腹腔注射,注射前两天对50.0mg/kg剂量组小鼠给予VE(10.0、3.2、1.0mg/kg)、VC(100.0、31.6、10.0mg/kg)灌胃,以后每天与香烟烟雾提取物一同给予,第13天处死小鼠,取双侧附睾,制成精子涂片观察结果。结果:空白对照组精子畸形率与溶剂对照组比较差异
2、无统计学意义(P>0.05),说明溶剂无致精子畸形作用;各实验组的精子畸形率与溶剂对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01),将各实验组的精子畸形率与香烟烟雾提取物的剂量做相关分析,有明显的相关关系(r=0.93,P<0.01)。结论:VE、VC能降低香烟烟雾提取物所致的小鼠精子畸形率,VE的拮抗作用优于VC。【关键词】维生素E;维生素C;香烟烟雾;小鼠;精子畸形吸烟严重地危害着人类健康,近年来研究发现,香烟在燃烧时可产生40多种明确的诱变/致癌物,自由基作为不可缺少的中间体,始终贯穿与活跃于香烟燃烧的气相和凝聚相反应中
3、。长期大量吸烟能不断消耗体内的抗氧化酶和抗氧化物质,使内源性自由基消除作用减弱,体内自由基蓄积中毒,最终引起细胞突变。已有实验证明,吸烟可使精子质量显著改变,而精子病变可能累及胎儿发育,致畸形增多。研究表明,维生素E(VE)、维生素C(VC)具有一定的消除自由基的能力,我们的实验旨在观察VC和VE对香烟烟雾提取物引起小鼠生殖细胞突变的拮抗效果。1材料与方法1.1材料市售去过滤嘴某牌香烟(云南产,焦油含量中等)。雄性健康昆明种小鼠140只,体重18~25g(本院动物室提供),随机分为14组,每组10只。VE注射液(上海第九制药厂),VC(分
4、析纯,天津市化学试剂批发公司)。1.2方法1.2.1制备香烟烟雾提取物按陈晓东的方法[1],以流水产生负压吸烟,调节水流控制吸烟速度,每支烟在10分钟左右燃完。用10%二甲基亚砜做为提取液,以称量法测得提取液中提取物的含量,制成香烟烟雾提取物原液,贮存备用。1.2.2染毒方法用蒸馏水将香烟烟雾提取物原液稀释成100.0、50.0、25.0、12.5和6.2mg/kg体重5个剂量组,以10%DMSO为溶剂对照。对各组小鼠每日腹腔注射1次,连续5日,第11、12两日再各注射1次,第13日处死。1.2.3拮抗方法VC、VE分别以估计不引起成人出
5、现明显不良反应的最大剂量即100.0和10.0mg/kg体重为最高剂量,再分别以蒸馏水和新购色拉油按3.16倍稀释,VC各剂量组分别为100.0、31.6、10.0mg/kg体重,VE各剂量组分别为10.0、3.2、1.0mg/kg体重,对香烟烟雾提取物50.0mg/kg组进行精子畸形拮抗观察,在染毒香烟烟雾提取物前先灌胃给予VC、VE,2天后以香烟烟雾提取物染毒方式同时给予。1.2.4精子制片及观察方法取双侧附睾,经剪碎、涂片、固定后在高倍镜下以暗视野观察。每只小鼠分析400条精子形态及结构的改变,记录精子畸形的类型及数量。1.2.5统
6、计学方法所有资料均采用SPSS10.0行×列表χ2检验及相关性分析。2结果2.1精子畸形香烟烟雾提取物对精子的损伤:在实验组中出现胖头、小头、不规则头、双头、双尾、折尾等精子畸形类型。空白对照组精子畸形率与溶剂对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),说明溶剂无致精子畸形作用;各实验组的精子畸形率与溶剂对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01),将各实验组的精子畸形率与香烟烟雾提取物的剂量做相关分析,有明显的相关关系(r=0.93,P<0.01)。见表1。表1香烟烟雾提取物致小鼠精子畸形情况2.2对精子畸形的拮抗效果给
7、予VC、VE后,除最小剂量组外,各实验组的精子畸形率与阳性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01),除最高拮抗剂量组外,其它各实验组与阴性对照组比较,差异仍有统计学意义(P<0.01)。精子畸形率与剂量间有相关关系。见表2。表2VC、VE对香烟烟雾提取物致小鼠精子畸形的拮抗情况3讨论VC、VE直接干扰自由基的生成和清除。VC作为一种强抗氧化剂,它的最大特性是还原性,通过还原作用消除有害氧自由基的毒性,其可以与O2·、HOO·及OH·迅速反应,生成半脱氢抗坏血酸;VE是直接清除剂,与超氧化物岐化酶、谷胱甘肽过氧化物一起构成体内抗氧化系
8、统,保护细胞膜及细胞内的核酸免受自由基的攻击[2]。作为机体有效的自由基清除剂,可阻断脂质过氧化反应,提高细胞的抗氧化防御作用。大量VC进入体内可增强机体的还原能力。VC和VE的抗突变机制,可
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