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1、第30卷第6期酿酒Vol130,No162003年11月LIQUORMAKINGNov.,2003文章编号:1002-8110(2003)06-0030-03环境诱导酵母产生子囊孢子的营养条件研究王丽丽,仪宏,侯建革,崔富昌,陈洁(河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄050018)摘要:研究了诱导酵母子囊孢子产生的营养条件。在氮源缺乏条件下,单独的乙酸盐可以诱导酵母菌子囊孢子的产生,在葡萄糖配合下,丙酸钠、草酸钠、柠檬酸钠等羧酸盐皆可以诱导子囊孢子产生,蛋白胨和过量的微量元素抑制子囊孢子的产生。关键词:酵母,子囊孢子,营养条件,羧酸盐,微量元素,诱导中图分类号:Q935文献标识码:A0前
2、言8mg,CuSO4·H2O3.9mg,蒸馏水100mL,加入1mol/LHCl使酵母具有重要经济价值,广泛应用于发酵、食品加工、饲之不再混浊为止。料、生化制药等方面,酵母及其发酵产品极大地改善了人类1.1.2.3乙酸钠液体诱孢培养基:由乙酸钠诱孢培养基中的生活,近年来,酵母菌又成为遗传工程中真核生物基因表去除琼脂,其它成分不变。达的良好受体。酵母并非微生物分类的专用名词,而是所有1.1.2.4乙酸钾、丙酸钠、草酸钠、柠檬酸钠、NaCl、葡萄糖诱[1-2]单细胞真核微生物的通称,酵母菌的种类超过600种。孢培养基:用乙酸钾、丙酸钠、草酸钠、柠檬酸钠、NaCl、葡萄酵母菌的繁殖分为无性繁殖和有性
3、繁殖。有性繁殖产生子糖分别等摩尔浓度替换乙酸钠诱孢培养基中的乙酸钠,其它囊孢子,有人把只进行无性繁殖的酵母菌称为“假酵母”,把成分不变,分别制成相应的固体诱导生孢培养基。具有有性繁殖的酵母称为“真酵母”。通常条件下酵母进行1.1.2.5琼脂诱孢培养基:琼脂2g,蒸馏水100mL,pH值自无性繁殖,在特殊条件的诱导下,二倍体酵母经减数分裂产然。生2～8个单倍体有性孢子,即子囊孢子。酵母菌能否产生1.1.2.6过量微量元素诱孢培养基:将乙酸钠诱孢培养基子囊孢子是酵母菌分类鉴定的重要依据,而且也是人工选育中的微量元素加量改为10倍量。优良杂交酵母菌株的重要基因纯核系来源。是否产生子囊1.1.2.7蛋
4、白胨诱孢培养基:在乙酸钠生孢培养基的基础孢子与酵母的遗传特性及培养基的诱导条件密切相关,吕红上,添加蛋白胨0.25%。[3][4]1.1.2.8葡萄糖复合诱孢培养基:分别在丙酸钠、草酸钠、线、曾洪梅分别探讨了酿酒酵母、面包酵母子囊孢子的形成条件的研究,证明了乙酸钠生孢培养基的良好效果,本柠檬酸钠的诱孢培养基中补加0.2%葡萄糖制成丙酸钠-葡文用5株不同酵母菌对诱导子囊孢子的营养条件进行了进萄糖、草酸钠-葡萄糖、柠檬酸钠-葡萄糖诱孢培养基。一步的研究。1.2实验方法1材料与方法1.2.1子囊孢子的诱导:将5株酵母菌接种于固体营养培1.1材料养基上,30℃培养3d,连续传接两次后,刮取酵母菌苔分别
5、1.1.1菌种:面包酵母、酒精酵母、啤酒酵母、产香酵母涂布在不同诱孢培养基斜面上,30℃培养7d,取样观察子囊1450、野生酵母309均为本实验室保藏菌种。孢子诱导情况。[6]1.1.2培养基:按以下配方配制,121℃灭菌25min。1.2.2子囊孢子的观察:采用石炭酸-美蓝复合染色法,1.1.2.1固体营养培养基:蔗糖2%,酵母膏0.5%,KH2PO4经染色后镜检,营养体呈蓝色,子囊孢子呈红色,观察记录子0.05%,FeSO4.7H2O0.001%,尿素0.3%,琼脂1.5%,pH5.囊在视野中百分比数,为生孢率。5。2实验结果1.1.2.2乙酸钠诱导生孢培养基[5]:无水乙酸钠0.82%,
6、2.1乙酸盐对子囊孢子生成的诱导作用KCl0.186%,复合微量元素溶液母液0.1mL/100mL,琼脂2g/将固体营养培养基活化好的5种酵母菌,分别接种于乙100mL,pH值自然。复合微量元素溶液的组成为:Na2B4O7·酸钠、乙酸钾、氯化钠诱孢培养基斜面上,培养7d后染色观10H2O0.8mg,(NH4)6Mo7O24·4H2O1.9mg,KI10mg,Fe2察,其结果见表1。由表1看出5株酵母菌在三种不同诱孢(SO4)3·6H2O22.8mg,MnCl2·4H2O3.6mg,ZnSO4·7H2O30.培养基生孢率差别很大,其中乙酸钠与乙酸钾诱导子囊孢子效果相当,而氯化钠没有诱导效果,说明
7、诱导子囊孢子的主要贡献是乙酸根,而非钠离子。收稿日期:2003-06-112.2其它有机酸盐对子囊孢子生成的诱导效果作者简介:王丽丽(1964-),女,河北省石家庄市人,副教授,验证了乙酸钠有良好的诱导生孢作用后,又进一步实验硕士,主要从事工业微生物的研究,主研多项省级攻关课题。了其它有机酸盐,如丙酸钠、柠檬酸钠和草酸钠的诱孢效果。©1994-2010ChinaAcademicJournalEle
