柳茶多糖的分离纯化及气相色谱质谱分析

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1、柳茶多糖的分离纯化及气相色谱-质谱分析作者：石磊，张冬梅，齐洁，李建银，杨永建【摘要】目的首次提取柳茶中的水溶性粗多糖并进行分离、纯化及组成分析。方法柳茶经热水提取、乙醇沉淀、Sevag法去蛋白、H2O2脱色，逆向流水透析得多糖精制品。将精多糖衍生化后运用气相色谱-质谱法对其化学成分进行分析。结果确定了柳茶中水溶性多糖分别由核糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成，其中以核糖、葡糖糖、半乳糖为主。结论该方法简便、灵敏，可以准确测定出柳茶多糖中所含有的各种单糖。【关键词】柳茶多糖;纯化;气相色谱-质谱;单糖　　Abstract：ObjectiveToisolateandpurifythe

2、water-solublepolysaccharidefromLiuchaandanalyzethechemicalcompositionofliucha.MethodsTheliuchawasextractedinhotwater，thenthepolysaccharideinthefiltratewasfractionallyprecipitatedbyalcohol，afterthattheproteinsintheprecipitatedproductwereremovedbySevagreagent，hydrogenperoxidedecolor，thehydroly

3、sateofpolysaccharidewasdialyzedbythereverseflowtogetthefineproduct.Finally，thechemicalcompositionsofthefineproductafter8derivatizationwereexaminedbythegaschromatography-massspectrometricanalysis.ResultsThepolysaccharidesarecomposedofribose，mannose，glucoseandgalactose.Themajormonosaccharideco

4、mponentsareribose，galactoseandglucose.ConclusionThemethodreportedinthispaperissimple，andcanbeusedforanalysisofmonosaccharideshydrolyzedfromLiuchapolysaccharide.　　Keywords：Liuchapolysaccharide;Purify;Gaschromatography-massspectrometry;Monosaccharide　　柳茶为藏族民间常用药，以蔷薇科(Rosaceae)鲜卑花属(Sibiraea)植物窄

5、叶鲜卑花Sibiraeaangustata(Rehd.)Hand-Mazz.和鲜卑花Sibiraealaecigata(L)Maxim.的枝叶及果序(带果实的果枝)入药，主要用于消食导滞、疏散风热;据藏药文献记载，柳茶主治热病和疫病[1]。现藏族民间常作茶饮，治疗食后腹胀等诸多原因引起的消化不良，每每见效。柳茶中除含有挥发油、微量元素外，通过实验发现还含有丰富的多糖。多糖作为提高机体免疫功能的保健品已被许多人接受，但许多多糖产品仅仅停留在保健品阶段，未能开发成药物，主要原因是多糖的分离纯化困难，技术不过关。因此本文旨在对柳茶多糖的提取、纯化、组分分析进行研究并对其营养保健功能进

6、行探讨，以期为柳茶的开发及其综合利用提供参考。8　　1仪器与材料　　1.1仪器UV-2450紫外分光光度计(日本岛津);NE2155电子天平(德国赛多利斯仪器公司);Agilent5793I-6890气相色谱-质谱联用仪(GC-MS);SE-54弹性石英毛细管柱(50m×0.25mmid×0.50μm);高纯氦(纯度≥99.999%);旋转蒸发仪(上海青浦泸西仪器厂)。　　1.2材料鲜卑花属植物叶采自甘肃省甘南藏族自治州合作市郊，海拔3200m以上。经兰州大学药学院生药学研究所杨永建教授鉴定其为蔷薇科(Rosaceae)鲜卑花属(Sibiraea)植物窄叶鲜卑花Sibiraea

7、angustata(Rehd.)Hand-Mazz.和鲜卑花Sibiraealaecigata(L)Maxim.的叶。　　单糖标准品葡糖糖、阿拉伯糖、核糖、甘露糖、木糖、果糖、半乳糖标准品(Fluka公司)，盐酸羟胺、吡啶、三氟乙酸、乙酸酐、氯仿以及其他试剂等均为国产分析纯，蒸馏水为实验室自制。　　2方法　　2.1多糖的提取与纯化8　　2.1.1粗多糖的提取取一定量的柳茶依次用石油醚、乙醚除去脂溶性杂质。加10倍量的水90～100℃提取3次，3h/次，合并水提液，过滤。70℃水浴减压浓缩至适