低分子量香菇多糖结构研究

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时间:2019-05-11

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1、东北师范大学硕士学位论文低分子量香菇多糖的结构研究姓名:王诗琪申请学位级别:硕士专业:生物化学与分子生物学指导教师:王桂云20090601摘要香菇是一种兼食用和药用为一体的大型真菌,香菇中最重要的香菇多糖有很明显的抗肿瘤,增强宿主对细菌、真菌、病毒和寄生虫感染的抵抗能力,增强自然杀伤细胞和细胞毒性T细胞活性等多种生物学和免疫学活性,其化学结构与活性关系密切,所以结构研究也逐渐成为研究热点.本文以香菇子实体为实验材料,分离纯化水溶性低分子量香菇多糖并对该多糖的结构进行研究,为更好的研究低分子量香菇多糖的生物学活性研究奠定了基础。该论文的主要研究内容:

2、香菇子实体热水煮提,将其滤液浓缩后,乙醇沉淀得到香菇粗多糖(C.LNT-I);C—LNT-1经反复冻融、高速离心(10000rpm)、95%乙醇沉淀得C.LNT-2;C.LNT-2经链蛋白酶酶解、Sevage法脱蛋白、凝胶柱层析方法纯化得水溶性香菇多糖;高效液相色谱(HPLC)分析,结果证明该纯化香菇多糖组分均一且分子量较低(Mw=7040Da),并命名为LMw.LNT。气相色谱(GC)分析结果表明LMw.LNT单糖组成主要为葡萄糖,半乳糖,甘露糖,阿拉伯糖,岩藻糖,其摩尔比为10.74:4.78:2.3:l:1.04。LMw—LNT经部分酸水解、

3、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化、GC.MS分析、IR分析等方法,确定其分子结构大体为:主链主要由Glc(1---,3)和Gal(1---*6)组成,并且有少量的Fuc(1--,2)。支链主要由Gal(1---,4),Glc(1--辛3)组成,并且含有少量的Fuc(1—2)Ara(1_3,5);分支点由Ara(1_3,5),Man(I---*2,4)构成;末端残基为Man。关键词:香菇多糖;分离纯化;结构AbstractLentinusedodes(L.edodes)isawellknownmacrofungiWithedibleandmedic

4、inalvalue,itspolysaccharideshaveavarietyofbiologicalandimmunologicalactivity,suchasanti—tumoreffects,stimulatetheformationofinterferon,strengthenhostresistancetobacterial,fungal,viralorparasiticinfections,enhancenaturalkiller(NK),cytotoxicTlympjocutes(CTL)activityandSOon.Itsch

5、emicalstructureisgreatosculationwithitsactivity,andso工.Edodes'schemicalstructureisgraduallyinvestigativehotspot.Bythisarticle,wetookthedrymushroomL.Edodesforexperimentmaterial,andresearchthestructureofthelowmolecularweightpolysaccharideswhichcansolubleinwater.Itwaslaythefounda

6、tionforlowmolecularweightpolysaccharides’Sstudiesonlocomotoractivity.Inthispaper:drymushroomL.edodeswereextractedwithdistilledwaterforthreetimes,thenthesupernatantwasconcentratedandprecipitatedwithethanoltoobtainthecrudepolysaccharide(designatedC-LNT-1).C—LNT-2wasrecoveredbyre

7、peatedfrozen,thawedandprecipitatingwith95%ethanolfromC—LNT-1.C-LNT-2wasdeproteinatedbyacombinationofproteinaseandSevagmethodandwasfurtherpurifiedbySepharoseCL一6Bgelfiltrationchromatographytogetthehomogeneityandlowmolecularweightlentinan(Mw=7040Da)(designatedLMw—LNT)whichwaseva

8、luatedbyHPLC.Gaschromatography(GC)analysisshowedthatLMw—LNTwa

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